[发明专利]一种毛蚶蛋白质的含量测定方法

权利要求书

1. 一种毛蚶蛋白质多肽的含量测定方法，其特征在于先用凝胶色谱柱高效液相色谱法确定被测样品中的多肽是毛蚶多肽，再用定氮法测定含量。

2.根据权利要求1的凝胶色谱柱高效液相色谱法确定被测样品中的多肽是毛蚶多肽，其特征在于具体步骤如下：

（1）色谱条件及系统适应性：用亲水球形高聚物为填充剂的凝胶色谱柱；以0.05mol/L的磷酸盐缓冲液为流动相；检测波长为280 nm；柱温：25℃；流速0.4ml/min；检测波长280nm；理论板数按蛋白质分子量100000计算不低于5000；

（2）称取样品10g，加12倍水超声提取30 min，离心10 min，取上层液，滤过，滤液按体积分数60%（w/v）加入硫酸铵，0～4℃放置过夜，离心，取沉淀，加水10ml溶解，以1%的碳酸氢铵溶液为透析液，用截留分子量为3500的透析膜，0～4℃条件下充分透析，将透析膜内溶液转移至50ml量瓶内，用水定容，0～4℃保存，即得毛蚶多肽溶液；    

（3）取毛蚶多肽溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，记录图谱；图谱中如果在保留时间15.6min±5%之内有毛蚶多肽。

3.根据权利要求1的定氮法测定含量方法，其特征在于称取样品0.5-2g，加20-40倍水，超声使分散均匀，加10-20%三氯乙酸15-40ml，混匀，静置20-50分钟，过滤，取滤纸及滤渣干燥，照《中国药典》2010年版一部附录Ⅸ L第一法，氮测定法测定毛蚶多肽的含量。

4.根据权利要求1或权力要求3的一种毛蚶蛋白质多肽的含量测定方法，其特征在于制剂中每g毛蚶提取物含毛蚶多肽不得少于0.12g，含量越高，疗效更好。

5.根据权利要求1或权利要求2或权利要求3或权利要求4的一种毛蚶蛋白质多肽的含量测定方法，其特征在于可用于毛蚶提取物各种制剂的含量测定。