[发明专利]6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷在制备抗癌药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷的新用途，具体为6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷在制备抗癌药物中的应用。

背景技术

恶性肿瘤严重威胁着人类的健康，是造成人类死亡的仅次于心血管疾病的第二号杀手。寻找天然、无毒、有效的抗肿瘤药物是世界医学面临的重要课题。细胞凋亡在维持机体处于稳定状态中起着重要作用，细胞凋亡异常与人体多种恶性肿瘤的发生发展过程密切相关。以选择性地抑制肿瘤细胞生长，诱导肿瘤细胞凋亡为目标的凋亡干预技术可能成为治疗恶性肿瘤的基本策略。

据报道，6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷具有抗氧化的作用，但从未有关于6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷抗肿瘤的报道。

6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷，结构式为：

分子式C₂₁H₂₀O₁₂,分子量为464，黄色粉末状化合物，可溶于甲醇，乙醇，二甲基亚砜等。

该化合物可由菊科植物红花属植物红花(Carthamus tinctorius L.)中提取制得。

发明内容

本发明的目的在于扩展6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷的用途，将其用于制备抗癌药物或辅助化疗药物。

本发明研究表明：6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷对正常细胞损伤很小，对肝癌HepG2细胞和胃癌SGC7901细胞具有明显的细胞毒性作用，其可通过诱导癌细胞凋亡达到抑制肿瘤细胞生长的作用。该化合物具有显著的抗肝癌和胃癌活性，可在制备抗肝癌、胃癌药物或者辅助化疗药中应用。

6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷可按常规方法从红花中提取，利用柱层析分离精制。

上述得到的6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷可进一步与载体混合或包埋，制成含有治疗有效量的6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷的药物组合物，其形式可为片剂、注射剂、悬浮液或溶液等多种形式。所用的载体可以为乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、聚乙二醇、明胶、环糊精等。组合物中还可加入润滑剂、湿润剂、矫味剂、悬浮剂、防腐剂等。组合物中6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷含量应大于50％，最好是90％以上。这些组合物可用于制备抗肝癌、胃癌药物或者辅助化疗药。

6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷也可作为食品添加剂用于制备防治肿瘤的功能性保健食品。

本发明对已知化合物6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷发掘了新的医疗用途，开拓了新的应用领域。6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷药理作用较强，可在制备抗肝癌、胃癌药物或者辅助化疗药中应用，也可在制备功能性保健食品中应用。

附图说明

图16-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷对几种肿瘤细胞株的增殖抑制效应图

图2荧光显微镜观察6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷对癌细胞的形态学变化

图3流式细胞术检测6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷对肝癌HepG2细胞和胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响

具体实施方式

实施例1

6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷对癌细胞的增殖抑制作用实验：

采用标准MTT比色法测定了该化合物对8种肿瘤细胞株的增殖抑制作用。受试肿瘤细胞株为人肝癌细胞株HepG2、胃癌细胞株SGC-7901、乳腺癌细胞株MCF-7、宫颈癌细胞株HeLa、胆管癌细胞株QBC-939、食管癌细胞EC9706，结肠癌细胞株SW480，神经胶质瘤细胞株C6，同时以人正常肝细胞HL-7702作为对照。

具体步骤为：取处于对数生长期、状态良好的各细胞，加入0.25％胰蛋白酶消化后，制成单细胞悬液，细胞计数板计数，按每孔100μl接种于96孔板中，每孔细胞数量控制在5×104/ml，37℃，5％CO2培养箱过夜培养，加入配制好的不同浓度(25-100μg/ml)的6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷，作用48h后每孔加入20μl MTT(5mg/ml)，继续培养4h，弃上清每孔加入150μl DMSO，振荡10min，待完全溶解后，与酶标免疫测定仪(Bio-Rad Model550)测定570nm处的吸光度值。按下列公式计算细胞增殖抑制率。细胞生长的抑制率＝(1–处理组A值/对照组A值)×100％，重复以上实验三次。