[发明专利]复合菌剂及其应用以及利用其制备有机肥的方法

权利要求书

1.复合菌剂，其特征在于，其活性成分包含枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、康宁木霉、米曲霉、绿色木霉、白地霉、黑曲霉、少孢根霉、植物乳杆菌和圆褐固氮菌。

2.根据权利要求1所述的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂的制备方法包括以下步骤：

ⅰ活化培养：将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、康宁木霉、米曲霉、绿色木霉、白地霉、黑曲霉、少孢根霉、植物乳杆菌和圆褐固氮菌分别取1～2环菌种接种至对应的活化培养基进行活化培养，得到各菌种的活化菌种液；

ⅱ扩大培养：将各菌种的活化菌种液按1％(V/V)的接种量分别接种到对应的扩大培养基中，进行扩大培养得到各菌种的种子液；

ⅲ固体培养：将各菌种的种子液等体积混合，按10％(V/W，ml/g)的接种比例接种到固体培养基中，在28～30℃下培养2～3天，然后在37～40℃下培养2～3天，得到固体种子；

ⅳ固体扩大培养：将固体种子按5％(W/W)接种比例添加到固体扩大培养基中，在30℃下培养3～5天，然后在37～40℃下培养3～5天，最后在50～55℃下干燥至含水量低于20％，得到复合菌剂。

3.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于，在步骤ⅰ中，各菌种的活化培养基重量百分比计的配方及培养条件如下：

枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌分别进行活化培养的第一活化培养基配方为：牛肉膏0.3％、蛋白胨1％、NaCl0.5％、余量为去离子水、pH7.4～7.6，培养条件为：转速150-200r/min、35-37℃、15～18h；

康宁木霉、米曲霉、绿色木霉、白地霉、黑曲霉、少孢根霉分别进行活化培养的第二活化培养基配方为：马铃薯20％、葡萄糖2％、余量为去离子水、pH自然，培养条件为：转速100～150r/min、28-30℃、24～28h；

植物乳杆菌进行活化培养的第三活化培养基配方为：蛋白胨1％、牛肉膏1％、酵母膏0.5％、柠檬酸氢二铵0.2％、葡萄糖2％、吐温0.1％、乙酸钠0.5％、磷酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.58‰、硫酸锰0.25‰、余量为去离子水、pH6.2～6.6，培养条件：35-37℃、24～28h、静置培养；

圆褐固氮菌进行活化培养的第四活化培养基配方为：葡萄糖1％、磷酸二氢钾0.2‰、氯化钠0.2‰、硫酸镁0.2‰、硫酸钙0.2‰、碳酸钙0.5％、余量为去离子水、pH7.0～7.2，转速150-200r/min、35-37℃、15～18h。

4.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于，在步骤ⅱ中，各菌种的扩大培养基重量百分比计的配方及培养条件如下：

枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌分别进行扩大培养的第一扩大培养基配方为牛肉膏0.3％、蛋白胨1％、NaCl0.5％、余量为去离子水、pH7.4～7.6，培养条件为：转速150～200r/min、35-37℃、15～18h；

康宁木霉、米曲霉、绿色木霉、白地霉、黑曲霉、少孢根霉进行扩大培养的第二扩大培养基配方为：马铃薯20％、葡萄糖2％、余量为去离子水、pH自然，培养条件为：转速100～150r/min、28～30℃、24～28h；

植物乳杆菌进行扩大培养的第三扩大培养基配方为：蛋白胨1％、牛肉膏1％、酵母膏0.5％、柠檬酸氢二铵0.2％、葡萄糖2％、吐温0.1％、乙酸钠0.5％、磷酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.58‰、硫酸锰0.25‰，余量为去离子水，pH6.2～6.6，培养条件为：35-37℃、24～28h、静置培养；

圆褐固氮菌进行扩大培养的第四扩大培养基配方为：葡萄糖1％、磷酸二氢钾0.2‰、氯化钠0.2‰、硫酸镁0.2‰、硫酸钙0.2‰、碳酸钙0.5％、余量为去离子水、pH7.0～7.2，培养条件为：转速150～200r/min、35-37℃、15～18h。

5.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于，在步骤ⅲ中：固体培养基为木薯酒糟或木薯酒糟与豆粕按5～8:1(W/W)混合或木薯酒糟、豆粕和秸秆按5～8:1:1(W/W)混合。

6.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于，在步骤ⅳ中：固体扩大培养基为木薯酒糟或木薯酒糟与豆粕按5～8:1(W/W)混合或木薯酒糟、豆粕和秸秆按5～8:1:1(W/W)混合。

7.根据权利要求5或6所述的复合菌剂，其特征在于，所述豆粕的粗蛋白含量≥43％。