[发明专利]TAT与PR domain的融合蛋白及其在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

【技术领域】

本发明涉及分子生物学技术领域，具体地说，涉及TAT与PR domain的融合蛋白及其在制备抗肿瘤药物中的应用。

【背景技术】

良性脑膜瘤（WHOI级）通常有良好的预后，然而非典型和恶性脑膜瘤（WHOII级和WHOIII级）预后较良性脑膜瘤差。良性脑膜瘤的预后主要取决于手术部位，而高级别脑膜瘤（WHOII级和WHOIII级）术后复发率较高，而且目前没有有效的化疗靶标。

抑癌基因RIZ1定位于染色体1p36，在多种肿瘤中均发现低表达或表达沉默，我们前期的研究结果发现，随着脑膜瘤级别的升高，RIZ1的表达量下降。PR-domain是RIZ1基因氨基末端的200个核苷酸序列，目前被证实是RIZ1基因发挥抑癌作用的主要功能区域。因此可以使用PR-domain的抑癌作用来治疗高级别脑膜瘤。

细胞穿膜肽（Cell-Penetrating Peptides，CPPs）能够有效地引导蛋白质甚至纳米粒子进入细胞，并可靶向细胞核，其穿膜能力不依赖经典的胞吞作用。TAT是HIV-1病毒中的反义激活多肽，全长86个氨基酸，可介导与其融合的多肽或蛋白跨越细胞膜或血脑屏障。TAT蛋白转导系统为PR domain蛋白应用于高级别脑膜瘤的治疗提供了一个有力的途径，有望于促进载体穿膜，发挥和加强PR-domain的抑癌作用。

目前尚未见细胞穿膜肽与PR-domain结合治疗肿瘤的报道。细胞穿膜肽能否有效引导外源蛋白进入细胞核取决于细胞穿膜肽和外源蛋白融合蛋白的构象，本发明则致力于构建能高效穿膜、抑癌效果好的TAT与PR domain的融合蛋白。

【发明内容】

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种TAT与PR domain的融合蛋白。

本发明的再一的目的是，提供一种编码TAT与PR domain的融合蛋白的核苷酸序列。

本发明的另一的目的是，提供一种表达载体。

本发明的第四个目的是，提供一种宿主细胞。

本发明的第五个目的是，提供上述TAT与PR domain的融合蛋白、编码TAT与PR domain的融合蛋白的核苷酸序列、表达载体、宿主细胞的用途。

本发明的第六个目的是，提供一种抗肿瘤的药物组合物。

为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：

一种TAT与PR domain的融合蛋白，所述TAT与PR domain的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.9所示。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：

一种编码TAT与PR domain的融合蛋白的核苷酸序列，所述的核苷酸序列如SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.10所示。

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：

一种表达载体，所述的表达载体含有如上所述的编码TAT与PR domain的融合蛋白的核苷酸序列。

为实现上述第四个目的，本发明采取的技术方案是：

一种宿主细胞，所述的宿主细胞含有如上所述的表达载体，或其基因组中整合有外源的如上所述的编码TAT与PR domain的融合蛋白的核苷酸序列。

所述的宿主细胞是细菌细胞、真菌细胞、或这些宿主细胞的后代。

为实现上述第五个目的，本发明采取的技术方案是：

如上所述TAT与PR domain的融合蛋白、所述的核苷酸序列、所述的表达载体或所述的宿主细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。

所述肿瘤为脑膜瘤。

为实现上述第六个目的，本发明采取的技术方案是：

一种抗肿瘤的药物组合物，所述的药物组合物包含如上所述TAT与PR domain的融合蛋白与常规药用载体。

本发明优点在于：