[发明专利]一种调控STAT3磷酸化的融合肽及其应用

说明书

技术领域：

本发明属于生物医药领域，涉及具有生物活性的多肽的人工设计和合成，特别涉及一种调控STAT3磷酸化的融合肽及其应用。

背景技术：

1、细胞因子信号转导抑制因子3激酶抑制区(KIR)研究进展

细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)作为细胞因子信号转导通路的重要抑制物，可以特异性地抑制炎症因子介导的JAK/STAT3信号通路，形成对JAK/STAT3通路的负反馈调节，在遏制炎性反应中起关键作用，因此被认为是最有潜力提高炎性损伤修复效果的治疗靶点。

SOCS3通常通过以下3种途径完成对JAK/STAT3信号通路的负性调控：(1)与STAT相似的SH2结构域竞争性结合细胞因子受体的磷酸化酪氨酸位点，阻止转录因子STAT3的活化(磷酸化)；(2)SOCS3的SH2结构域与通路中的JAK结合，竞争性抑制JAK与底物的结合；(3)利用其C端的SOCS盒与延伸蛋白BC复合体结合，将与SOCS3结合的信号蛋白通过泛素化途径降解，从而阻断细胞因子的信号传递。除此之外，SOCS3和SOCS家族中的另一个成员SOCS1的N端存在其独特的激酶抑制区(KIR)，可作为假底物与JAK的催化位点结合，抑制酪氨酸激酶的活性，从而阻止转录因子STAT3的活化。SOCS3通过负性调节炎性因子介导的JAK/STAT3信号转导通路的活化从而发挥对抗炎症反应的作用，但内源性的SOCS3被诱导后很快降解，不足以遏制病理情况下的炎症信号。

因此，利用外源性添加SOCS3蛋白来抑制急性炎症反应成为近年来的研究热点。已有研究证实SOCS1的KIR与SOCS1的作用相似，可以完成对JAK/STAT信号通路的调控作用。

2、穿膜肽的研究进展

生物大分子在许多疾病的治疗中发挥着重要作用，而由于细胞膜的天然屏障作用，使得这类有治疗价值但无细胞膜穿透性的大分子在细胞生物学，药学及临床治疗中的应用大大受到限制。细胞穿膜肽(cell-penetrating peptides，CPPs)是近年来相继发现的一些具有细胞穿透功能的氨基酸序列，长度为几个至几十个氨基酸不等，多数小于20个氨基酸。其可以有效地将蛋白、多肽等生物大分子通过无受体介导、无耗能的方式，导入细胞内，且在一定浓度范围内不会造成细胞损伤。CPPs的发现为生物大分子用于疾病治疗带来了曙光。将它们作为生物活性分子的细胞内转运工具，应用于细胞生物学、药物体内转运、临床药物治疗等领域，具有诱人的前景。

发明内容

本发明解决的问题在于提供一种调控STAT3磷酸化的融合肽及其应用，该融合肽是基于穿膜肽(TAT)和细胞因子信号转导抑制因子3激酶抑制区(KIR)融合，可用于制备提高炎性损伤修复效果的药物。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种调控STAT3磷酸化的融合肽，通过连接蛋白将穿膜肽TAT的C端与细胞因子信号转导抑制因子3激酶抑制区KIR的N端连接。

所述穿膜肽TAT的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，细胞因子信号转导抑制因子3激酶抑制区KIR的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

所述的连接蛋白为Leu-Arg。

所述的调控STAT3磷酸化的融合肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

所述的调控STAT3磷酸化的融合肽在制备负性调控STAT3磷酸化的药物中的应用。

所述的药物为负性调控炎性因子介导STAT3磷酸化的药物。

所述的调控STAT3磷酸化的融合肽在制备抑制JAK/STAT3信号通路的活化的药物中的应用。

所述的调控STAT3磷酸化的融合肽在制备抑制脑损伤后炎性反应的药物中的应用。

所述的药物是抑制炎症反应、促进损伤修复的药物。

所述的调控STAT3磷酸化的融合肽在制备抗脑损伤的药物中的应用。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明采用穿膜肽与细胞因子信号转导抑制因子3激酶抑制区的融合肽，通过截取了SOCS3蛋白上截取的一部分序列，一方面减少了目的肽的分子量，增加了穿膜肽的穿膜效率，以保证其能够进入胞内；另一方面在减少分子量的同时，还筛选可能具有抑制活性的KIR序列；结果表明所构建的融合肽既具有较好的穿膜活性，又能够负性调控STAT3的磷酸化，抑制JAK/STAT3信号通路的活化。