[发明专利]拟南芥锌指蛋白基因ZFP6在促进烟草腺毛生长中的应用无效
申请号: | 201410158764.3 | 申请日: | 2014-04-18 |
公开(公告)号: | CN103966232A | 公开(公告)日: | 2014-08-06 |
发明(设计)人: | 甘银波;颜安;安丽君;周忠静;孟小芳;刘伯涵;张爱冬 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/84;C12N1/21;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 马士林 |
地址: | 310027 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 拟南芥 蛋白 基因 zfp6 促进 烟草 腺毛 生长 中的 应用 | ||
技术领域
本发明属于生物工程技术领域,尤其涉及一种拟南芥锌指蛋白基因ZFP6在促进烟草腺毛生长中的应用。
背景技术
烟草已成为21世纪全球市场上最重要的经济作物之一,它不仅是100多个国家烟农的收入来源,而且整个烟草行业涉及到不同生产部门和批发零售环节,已成为许多国家的重要经济力量;随着烟草业的发展,许多国家的地方及当地政府的税收有了大幅度提高。
烟草是高效益作物,我国烟草的种植面积和产量均居世界第一位。在所有烟叶类型中,烤烟种植最为广泛。我国是全球生产烤烟最多的国家,我国烤烟种植面积和总产量都居世界首位,其烤烟产量约占全球烤烟产量的50%左右,发展优质烟叶不管是对烟农还是卷烟工业都是十分重要的。烟草又是高税利商品,农业税利30%左右,工业税利60%以上,1987-2001年,烟草行业实现的税利合计连续14年高居国民经济各行业之首,为国家建设做出了巨大的贡献。因此,研究和开发综合性状良好的烟草品种,提高烟草的生产水平对于增加国家和地方财政收入,解决“三农”问题和新农村建设具有十分重要的意义。
烟草育种重点考虑的问题是烟叶香味和烟叶安全性等,提高香气品质是国内外烟草育种的核心之一。烟叶香气不足是影响烟叶质量的一个主要因素,尤其目前低烟碱、低焦油的烟草产业发展方向,使得烟叶香味不足的问题更为突出。烟草腺毛是烟叶表皮系统的重要组成部分,烟叶腺毛胶状分泌物与烟叶香气物质产生密切相关,而腺毛密度和类型直接影响着腺毛分泌物的质和量,而分泌物的量又直接影响叶片的香气品质,腺毛密度越大,多细胞头部的腺毛所占比例越大,叶片香气品质越好(烟草叶片腺毛及其分泌物研究进展.贵州农业科学,2009,37(8):61~64)。。因此,烟叶腺毛的研究对烟草新品种的选育和优质烟草栽培技术的实施,以及提高烟草香气质和香气量的研究都具有重要的指导意义。目前国内外虽然已在烟草腺毛方面进行了大量研究,但对腺毛形成和发育的调控机制和腺毛密度的遗传规律,特别是在腺毛与烟草香气形成之间关系的研究方面还远远不够,因此,从分子水平上研究控制烟草腺毛及香气形成的机制,不仅具有重要的理论意义,同时也具有潜在的应用价值。
发明内容
本发明提供了一种拟南芥锌指蛋白基因ZFP6在促进烟草腺毛生长中的应用,在烟草中外源表达拟南芥指蛋白基因ZFP6能够提高烟草叶片腺毛的生长密度。
一种拟南芥锌指蛋白基因ZFP6在促进烟草腺毛生长中的应用,所述的拟南芥锌指蛋白基因ZFP6的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
所述的应用,包括:将所述的拟南芥锌指蛋白基因ZFP6连入植物表达载体中,构建得到重组表达载体,再将所述的重组表达载体转化烟草。
重组表达载体的构建可采用常规方法,如可采用Gateway系统(Invitrogen公司)将拟南芥ZFP6基因(即拟南芥锌指蛋白基因ZFP6)连入植物表达载体中。
所述的植物表达载体可以为pH2GW7、pK2GW7等。
所述的重组表达载体中,启动所述拟南芥ZFP6基因表达的启动子为强启动子。强启动子能够启动拟南芥ZFP6基因过表达,可提高烟草叶片腺毛的生长密度。所述的强启动子为35S。
转化烟草时,可采用农杆菌介导转化的方法,所述的农杆菌具体可以为农杆菌GV3101、EHA105等。
所述烟草的品种可以为珊西烟,但不仅限于珊西烟。
本发明还提供了一种重组表达载体,包括原始载体以及插入所述原始载体的目的基因,所述目的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
所述的重组表达载体中,所述的原始载体可以为pH2GW7、pK2GW7等。
本发明还提供了一种包含所述植物表达载体的重组转化子。
所述的重组转化子中,宿主菌可以为农杆菌,具体可以为农杆菌GV3101、EHA105等。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
本发明通过克隆拟南芥ZFP6基因,并在烟草中进行遗传转化,过量表达外源拟南芥ZFP6基因能够显著提高烟草叶片腺毛数量,提高腺毛生长密度,而对不分泌次生代谢产物的保护毛数量没有影响。本发明有助于研究腺毛形成和发育的调控机制和腺毛密度的遗传规律,基于腺毛与烟草香气的密切关系,本发明能够提高烟草叶片香气品质,有助于研究控制烟草腺毛及香气形成的机制,具有重要的理论意义及潜在的应用价值。
附图说明
图1为野生型(WT)和转基因烟草(35S:ZFP6)不同龄期叶片表皮毛数量统计。
具体实施方式
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