[发明专利]一种与植物根系性状相关的SNP位点及其应用有效
| 申请号: | 201410157719.6 | 申请日: | 2014-04-18 |
| 公开(公告)号: | CN103952402A | 公开(公告)日: | 2014-07-30 |
| 发明(设计)人: | 何中虎;肖永贵;夏先春;陈新民;李思敏 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;陈晓庆 |
| 地址: | 100081 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 植物 根系 性状 相关 snp 及其 应用 | ||
1.一种与植物根系性状相关的SNP位点,该SNP位点为SEQ ID No.4中自5’末端起第55位核苷酸,该第55bp位核苷酸为C和/或G;SEQ ID No.4所示DNA片段在小麦染色体1BS上的19.3cM位置。
2.一种与植物根系性状相关的含有SNP位点的DNA片段,其特征在于:该DNA片段的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示,其中,该序列第55bp处碱基为C和/或G;
并且该DNA片段在小麦染色体1BS上的19.3cM位置。
3.一种用于检测权利要求1所述SNP位点的特异引物组,所述特异引物组包括两条引物,第一条引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,另一条引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
4.根据权利要求3所述的特异引物组,其特征在于,还包括一条引物,该引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
5.一种辅助筛选优良根系植物的PCR试剂盒,其特征在于:
所述PCR试剂盒包括权利要求2或3所述特异引物组和PCR扩增缓冲液;
所述PCR扩增缓冲液包括DNA聚合酶、dNTP、MgCl2、KCl、Tris和水。
所述PCR扩增缓冲液的PH值为9.0;
所述特异引物组中每条引物在所述PCR试剂盒中的终浓度均为0.25uM;
所述Tris-HCl在所述PCR试剂盒中的终浓度为1mmol·L-1;
所述KCl在所述PCR试剂盒中的终浓度为5mmol·L-1;
所述MgCl2在所述PCR试剂盒中的终浓度为2.5mmol·L-1;
所述dNTPs在所述PCR试剂盒中的终浓度为200μmol·L-1;
所述DNA聚合酶在所述PCR试剂盒中的终浓度为1.5U。
6.权利要求1所述SNP位点、权利要求2所述DNA片段、权利要求3或4所述的特异引物组、或权利要求4所述PCR试剂盒在辅助筛选优良根系植物中的应用。
7.一种鉴别优良根系植物的方法,包括如下步骤:检测待测植物的染色体1BS上的19.3cM位置是否含有权利要求1所述SNP位点,并且检测该SNP位点的基因型;基因型为CC的植物的根系优于基因型为CG或GG的植物。
8.一种辅助筛选优良根系植物的方法,包括如下步骤:检测待测植物的染色体1BS上的19.3cM位置是否含有权利要求1所述SNP位点,并且检测该SNP位点的基因型;若基因型为CC,则判定所述待测植物为候选的优良根系植物。
9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述“检测待测植物的染色体1BS上的19.3cM位置是否含有权利要求1所述SNP位点,并且检测该SNP位点的基因型”的方法为如下(1)或(2):
(1)利用权利要求3或4所述的特异引物组或权利要求4所述PCR试剂盒,对待测植物进行PCR扩增,对PCR扩增产物进行测序;若测序结果为SEQ ID No.4,且自其5’末端起第55位为C,则判定待测植物的SNP位点的基因型为CC;若测序结果为SEQ ID No.4和SEQ ID No.5,且自SEQ ID No.45’末端起第55位为C或G,则判定待测植物的SNP位点的基因型为CG或GG;
(2)利用权利要求3或4所述的特异引物组或权利要求4所述PCR试剂盒,对待测植物进行PCR扩增,对PCR扩增产物进行凝胶电泳;若电泳显示扩增产物为173bp的一种片段,则判定待测植物的SNP位点的基因型为CC;若电泳显示扩增产物为173bp和138bp的两种片段,则判定待测植物的SNP位点的基因型为CG或GG。
10.根据权利要求6所述的应用、权利要求7-9任一所述的方法,其特征在于:
所述植物为小麦;
所述小麦具体为如下品种中的任一种或任几种:碧蚂1号、藁城8901、邯6172、淮麦18、淮麦20、济麦19、济麦21、京双16、济麦22、晋麦45、良星66、临旱2号、良星99、陕354、绵阳26、烟农19、皖麦38、汶农14、西农979、小偃54、扬麦9号、中优9507、豫麦63、中麦895、周麦16、周麦18、周麦22、周麦31、周麦32、济麦20;
所述优良根系为根系总长长;
所述“基因型为CC的植物的根系优于基因型为CG或GG的植物”为基因型为CC的植物的根系总长长于基因型为CG或GG的植物;
所述根系总长长为小麦三叶期幼苗根系总长≥340cm,具体为根系总长≥349cm。
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