[发明专利]一种从山瑞鳖甲中提取粗多糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种粗多糖的制备方法，具体涉及一种从山瑞鳖甲中提取粗多糖的方法。

背景技术

山瑞鳖，又叫山瑞，拉丁文名：Palea steindachneri.龟鳖目、鳖科下动物，生活于山地的河流和池塘中。喜欢生长在石山区的小溪石缝中，故有“山珍”之誉。我国只有鳖、山瑞鳖和中华鳖3种。山瑞鳖在动物分类学上隶属于爬行纲、龟科、龟亚科，是最常见的龟鳖目动物之一。山瑞鳖是以动物性饵料为主的杂食性动物。在自然界，它吃小鱼、小虾、昆虫、蠕虫等；外形呈圆形，与俗称“甲鱼”的中华鳖十分相似；山瑞鳖较为肥厚，体积比一般的中华鳖大很多，且头两侧有好些疣粒。体长30—40厘米，宽23厘米左右，体重20千克左右。山瑞鳖的鳖甲，富含多糖，具有抑制结缔组织的增生、提高血浆蛋白、散结消肿的作用，可提高抗肿瘤的免疫能力。多糖是一类广泛存在于动物、植物和微生物细胞中具有特殊活性的重要生物大分子物质。随着分子生物学研究的进展，人们逐渐发现不同来源的多糖具有广泛而复杂的生物活性，已经引起医药界高度重视，并成为当今生命科学研究的热点之一。多糖具有免疫调节作用、抗肿瘤作用、抗病毒作用、抗衰老作用、抗动脉粥样硬化作用、对物质代谢具有影响、抗溃疡作用、类肾上腺皮质激素和促肾上腺皮质激素作用以及对辐射损伤的保护等作用。

目前已报道的研究方法主要集中于植物组织中多糖的提取，包括热水浸提、稀酸、稀碱、酶法提取等。动物组织多糖成分的提取方法包括分级沉淀、透析、柱层析、超滤、制备性区域电泳等。由于动物多糖结构复杂，具有许多不同单糖残基、连接位置和糖苷键，能形成具有不同的构象，在分离制备时，应根据不同的动物来源采用不同的方法进行提取提取。

超临界流体萃取(Supercritical Fluid Extraction,SFE)是利用流体在临界点附近所具有的特殊性质而形成的新兴萃取技术。超临界CO₂是最常使用的一种流体，它既不是液体，也不是气体，但具备液体的高密度和气体的低粘度的性质，因此有较高的溶解能力及较高的扩散性能，可以和样品充分的混合、接触，最大限度的发挥其溶解能力。由于超临界CO₂流体对非极性及中极性化合物的提取效率较高，但对极性较强、分子量较大(如多糖等)的物质提取率低，为了提高对一些极性物质的选择性，常采用在超临界CO₂萃取体系中加入适宜的夹带剂(或改性剂)的方法，常用的夹带剂有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、水等，使用夹带剂改善CO₂流体溶解性质，使得超临界CO₂提取多糖等极性强的物质成为可能。

虽然利用超临界CO₂流体萃取技术萃取某些植物多糖(如香菇、茯苓等)的研究已有报道，但采用超临界CO₂流体萃取技术萃取山瑞鳖甲粗多糖的研究还未见报道。

发明内容

本发明提供了一种工艺简单、效率高的从山瑞鳖甲中提取粗多糖的方法。

本发明是通过如下技术方案实现的:

一种从山瑞鳖甲中提取粗多糖的方法，包括下述步骤:

a.原料处理：取山瑞鳖，去除内脏后，清洗干净，保留鳖甲；

b.水解：加入8-10倍量的纯净水，用1M HCl调节混合物pH值至2.0-2.5，煮沸后维持压力0.1Mpa水解8-10小时，加入1M NaOH调pH值至7.0，得到膏状水解物；

c.超临界CO₂流体萃取：将膏状水解物置于萃取釜中，以超临界CO₂流体为萃取溶剂，以体积浓度为55-65%的乙醇溶液为夹带剂进行超临界萃取，所述膏状水解物的质量与所述萃取釜的体积比为1:4，所述乙醇溶液的体积与所述萃取釜的体积比为1:2；所述的萃取温度为55-60℃，萃取压力为25-30Mpa，萃取时间为1.0-1.5小时；

d.收集萃取完后得到的提取液，进行冷冻干燥，得成品。

本发明所述乙醇溶液的体积与所述萃取釜的体积单位为L，所述膏状水解物质量单位为Kg。

所述的萃取温度优选55℃，萃取压力优选25Mpa，萃取时间优选1.5个小时。

采用本发明的方法得到的粗多糖，具有如下性状：

白色结晶粉末；味微苦，易溶于水。

采用本发明的方法以山瑞鳖甲为原料提取粗多糖，与现有技术相比，本发明的优点：