[发明专利]一种利用自组装细胞芯片转染蛋白质或化合物的方法

权利要求书

1.自组装细胞芯片在转染蛋白质或化合物中的应用；所述自组装细胞芯片包括基底，在所述基底上设有用于固定所述蛋白质或化合物的区域；在所述基底上除用于固定所述蛋白质或化合物的区域外的其他区域覆盖抑制细胞生长的聚-N-异丙基丙烯酰胺膜。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述蛋白质为表皮生长因子或转化生长因子β；所述化合物为G418。

3.一种定点转染蛋白质或化合物的方法，包括如下步骤：

1）将待转染物质通过明胶包裹得到转染复合物；

所述待转染物质为蛋白质或化合物；

2）将所述转染复合物固定到自组装细胞芯片上，得到固定待转染物质的芯片；

所述自组装细胞芯片包括基底，在所述基底上设有用于固定所述转染蛋白质或化合物的区域；在所述基底上除用于固定所述转染蛋白质或化合物的区域外的其他区域覆盖抑制细胞生长的聚-N-异丙基丙烯酰胺膜；

3）将目的细胞接种到所述固定待转染物质的芯片上，培养；实现所述待转染物质转染到所述目的细胞中。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：

步骤1）中，所述将待转染物质通过明胶包裹得到转染复合物的方法包括如下步骤：将待转染物质溶液与明胶溶液混匀，孵育，得到转染复合物；

步骤2）中，所述将所述转染复合物固定到自组装细胞芯片上的方法包括如下步骤：先将所述转染复合物点样在所述自组装细胞芯片上的用于固定所述转染蛋白质或化合物的区域，再进行干燥。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：

所述待转染物质为蛋白质或化合物；

所述待转染物质溶液为待转染物质水溶液；

所述明胶溶液由明胶、纤维连接蛋白和水组成，其中明胶在溶液中的质量百分含量为0.4%，纤维连接蛋白在溶液中的质量百分含量为0.01%。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：

步骤1）中，所述蛋白质与所述明胶的质量比为1：1×10⁶-1×10⁸，所述蛋白质与所述明胶的质量比具体为1:4×10⁶；

所述化合物与所述明胶的质量比为1:3-5，所述化合物与所述明胶的质量比具体为1:4；

步骤3）中，所述目的细胞和所述蛋白质的配比为1×10⁴-1×10⁷个：1纳克，所述目的细胞和所述蛋白质的配比具体为4×10⁶个：1纳克；

所述目的细胞和所述化合物的配比为10-1×10⁷个：1纳克，所述目的细胞和所述化合物的配比具体为20个：1纳克。

7.根据权利要求4-6中任一所述的方法，其特征在于：

步骤1）中，所述孵育的温度为25-28℃，所述孵育的时间为5min-30min；所述孵育的温度具体为25℃，所述孵育的时间具体为5min；

步骤2）中，所述干燥的时间为2-20h；所述干燥的时间具体为12h；

步骤3）中，所述培养的温度为34-45℃；所述培养时间为12-48小时；所述培养的温度具体为37℃；所述培养时间具体为24小时。

8.根据权利要求4-7中任一所述的方法，其特征在于：

所述蛋白质为表皮生长因子或转化生长因子β；

所述化合物为G418；

所述目标细胞为Hela细胞或含有GFP蛋白表达的Hela细胞。