[发明专利]人源发酵乳杆菌grx07及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一株对慢性酒精性肝损伤有保护作用的人源发酵乳杆菌grx07及该菌株在发酵乳制品及功能性食品或药品方面的应用。

技术背景

由于长期大量饮酒所致的慢性肝脏疾病是造成人类肝脏损伤的重要原因之一，而在我国，随着人民生活水平的提高，酗酒者增多，长期酗酒也成为继病毒性肝炎后导致肝损伤的第二大病因。酒精性肝损伤初期通常表现为脂肪肝，进而可发展成酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化。因此探寻酒精性肝病的发病机制和防治干预措施具有十分重要的意义。

酒精性损伤的发病机制较为复杂，其主要原因是乙醇在肝细胞内代谢产生的毒性代谢产物以及由此引起的代谢紊乱，也与内毒素、活性氧自由基、炎性因子等的损伤作用有关。具体为：（1）乙醛的毒性作用。乙醇在肝细胞中代谢成乙醛时形成的乙醛蛋白加合物不但会改变蛋白质的结构，影响其功能，也会引起自身免疫反应。（2）内毒素。长期大量摄入酒精会导致肠道菌群失调，肠道通透性增加，使内毒素大量进入血液，并可激活Kupffer细胞产生炎性因子，导致肝脏炎症反应。（3）活性氧自由基的损伤。乙醇代谢生成大量活性氧自由基，损害细胞DNA、蛋白质和磷脂，加剧肝损伤。（4）炎性因子的损伤。炎性因子诱发的炎症反应在酒精性肝损伤的发展中发挥了十分重要的作用。

目前，对酒精性肝损伤的防治措施也多基于其发病机制，如戒酒、营养治疗、抗氧化剂、抗内毒素制剂等。药物治疗也多基于抗氧化作用从而改善酒精所致的氧化应激，但药物的摄入可能进一步加重肝脏负担，并且存在一定的不良反应和毒副作用。寻找更为安全有效的干预措施就尤为迫切。

益生菌具有广泛的生理活性，如益生菌可调节肠道菌群，降低内毒素含量；可有效清除自由基，增强机体的抗氧化能力；可增强机体免疫力。益生菌的这些生理活性提示人们其对酒精性肝损伤的缓解可能有一定作用。而且，应用于人类的益生菌一般要来自于健康人体本身，以确保其安全性。但目前有关人源益生菌缓解酒精性肝损伤的研究报道相对较少，而市场上相关的功能性食品更是鲜见。因此，利用人源益生菌及其产品来缓解酒精性肝损伤具有重要的研究意义和广阔的市场前景。

本发明人针对酒精性肝损伤的发病机制，从江苏如皋长寿村人群肠道中分离获得的益生菌中筛选具有显著抗氧化和抑菌活性的益生菌，并研究其对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用，从而获得本发明益生菌，并对其应用加以研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一株具有抗氧化和抑制致病菌能力，并对慢性酒精性肝损伤具有保护作用的人源益生菌——发酵乳杆菌grx07。

下面详细地描述本发明。

本发明涉及一株人源发酵乳杆菌grx07，该菌株已于2014年2月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心（地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所），分类命名为发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum，保藏号：CGMCC No.8874。

本发明还公开了所述的发酵乳杆菌grx07在制备具有保肝作用发酵乳制品、功能性食品或药品中的应用。所述保肝作用是对慢性酒精性肝损伤的保护作用。

所述的发酵乳杆菌grx07的功能特性如下：

本发明的发酵乳杆菌grx07具有较高的体外抗氧化活性：菌体浓度为1.0×10⁹cfu/mL的发酵乳杆菌grx07发酵液的羟自由基清除率为67.165%、DPPH自由基清除率为89.656%、还原能力A_700nm值为2.752。

本发明的发酵乳杆菌grx07对致病菌具有较强的抑制能力：发酵乳杆菌grx07的发酵上清液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌具有中度抑菌作用以上，抑菌圈直径分别为21.40mm、21.50mm、19.50mm。

本发明的发酵乳杆菌grx07对慢性酒精性肝损伤具有保护作用：动物实验结果表明，本发明的发酵乳杆菌grx07能显著降低慢性酒精性肝损伤大鼠ALT、AST水平；显著降低大鼠血脂、血清内毒素含量；改善大鼠氧化应激状态和炎症反应；增强大鼠肝脏抗氧化蛋白Nrf2的表达量；减少肝细胞凋亡百分数，对慢性酒精性肝损伤具有明显的保护作用，甚至优于保肝药物东宝甘泰。

附图说明

图1为发酵乳杆菌grx07的菌落形态图。

图2为发酵乳杆菌grx07革兰氏染色的菌体形态图。

图3为发酵乳杆菌grx07的生长曲线图。