[发明专利]植物乳杆菌、干酪乳杆菌和地衣芽孢杆菌复合菌剂的制备

说明书

技术领域

本发明属于益生菌发酵技术领域，具体涉及一种以豆粕、麸皮和玉米粉为基质，以益生菌植物乳杆菌HM-10(Lactobacillus plantarum HM-10)、干酪乳杆菌HM-09(Lactobacillus casei HM-09)和地衣芽孢杆菌BL-09(Bacillus licheniformis BL-09)为菌种的混合固态发酵技术，此技术可广泛应用于动物微生态等方面。

背景技术

目前，益生菌制品多采用益生菌直接与液态牛乳和豆乳发酵，得到功能性的酸牛奶或者酸豆奶，其余则采用液态发酵，直接收集益生菌菌体，制作成益生菌粉剂、片剂或者胶囊。采用液态发酵会产生大量的废水，对环境污染较大，后处理比较困难，机器设备操作繁琐。因此本申请采用植物乳杆菌HM-10、干酪乳杆菌HM-09和地衣芽孢杆菌BL-09混合固态发酵豆粕、麸皮和玉米粉，采用固态发酵，其生产成本低，投资的资金较少，在下游处理方便，污染小，设备结构简单、易操作。采用植物乳杆菌HM-10、干酪乳杆菌HM-09和地衣芽孢杆菌BL-09进行混菌固态发酵，可生产出一种具有酸香气味的发酵制品，改善动物饲料的适口性。其蛋白质被分解成小肽和游离氨基酸，有利于动物肠胃消化吸收。

专利《一种有效预防及改善牛乳房炎的复合乳酸菌微生态制剂》，CN103202391A，公开了含有干酪乳杆菌HM-09、植物乳杆菌HM-10的复合微生态制剂。所述干酪乳杆菌和植物乳杆菌已于2012年10月29日在地址为北京市大屯路，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，干酪乳杆菌HM-09(L.casei HM-09)保藏号：CGMCC No.6736；植物乳杆菌HM-10（L.plantarum HM-10）保藏号：CGMCC No.6741。

发明内容

本发明目的在于提供一种以豆粕、麸皮和玉米粉为基质，采用植物乳杆菌HM-10(Lactobacillus plantarum HM-10)、干酪乳杆菌HM-09（Lactobacillus casei HM-09）和地衣芽孢杆菌BL-09（Bacillus licheniformis BL-09）进行混合固态发酵，可广泛应用于微生态领域的益生菌固体发酵技术，此方法可以生产出具有特殊酸香味的发酵型饲料产品，且发酵产品的活菌数高，豆粕蛋白质的降解率高。此制备方法生产成本低，可以提高经济效益并且操作简单。

本发明目的是通过下述技术方案实现的。

一种以豆粕、麸皮和玉米粉为基质可广泛应用于微生态领域的益生菌固体发酵技术，包括植物乳杆菌HM-10、干酪乳杆菌HM-09和地衣芽孢杆菌BL-09的培养及其混合固态发酵，得到益生菌的固态发酵产品。

所述混合固态发酵培养为：先分别以1-5%接种量（v/w）将植物乳杆菌HM-10和干酪乳杆菌HM-09接种于固态发酵培养基，控温30-37℃，相对湿度50%-60%,发酵0-12h后以2-8%接种量（v/w）接入地衣芽孢杆菌BL-09进行混合固态发酵，其他条件不变，继续发酵24-36h。

固态发酵培养基组成包括豆粕、麸皮和玉米粉，所述豆粕、麸皮和玉米粉的质量比例为：豆粕、麸皮、玉米粉=10:8-10:0.5-1。水份含量控制在40-75%。

在最佳控制条件下，固态发酵中同时接种1%（v/w）的植物乳杆菌HM-10和1%（v/w）的干酪乳杆菌HM-09，其他条件保持一致，混菌发酵12h后，再接种5%（v/w）的地衣芽孢杆菌BL-09，再继续混菌发酵36h。测定游离氨基态氮含量可达到1090.0μmol/g，较发酵前提高约11倍。地衣芽孢杆菌BL-09芽孢率较单独发酵提高约3倍。混合发酵的益生菌活菌数在10¹⁰cfu/g以上，其中植物乳杆菌HM-10活菌数达3.55×0⁹cfu/g、干酪乳杆菌HM-09活菌数达3.89×0⁹cfu/g、地衣芽孢杆菌BL-09活菌数达1.29×10¹⁰cfu/g。

所述植物乳杆菌HM-10、干酪乳杆菌HM-09和地衣芽孢杆菌BL-09在混合固态发酵前分别经过种子培养。种子培养基为(g/L)：蛋白胨10-20，葡萄糖10-20，其余为水，pH7.0-7.2。地衣芽孢杆菌BL-09的种子培养条件：摇床转速为150-180r/min，温度为34-37℃，培养20-24h。所述的植物乳杆菌HM-10和干酪乳杆菌HM-09的种子培养条件，分别置于恒温培养箱静置培养，培养温度30-37℃，培养时间为20-24h。