[发明专利]一种制备胶体金标记的装载有PD药物的纳米脂质体的方法

权利要求书

1.一种制备胶体金标记的装载有PD药物的纳米脂质体的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1) 避光条件下称取药物左旋多巴或金刚烷胺溶于去离子水中，在棕色容量瓶定容，制成左旋多巴或金刚烷胺PD药物母液；按照质量比，m_{大豆卵磷脂}：m_胆固醇 =（ 5:1 ）~（10:1）取大豆卵磷脂与胆固醇，将其溶于无水乙醇，在烧杯口上盖一层锡箔纸，制成无水乙醇溶液；分别吸取PD药物母液、胶体金母液溶于PBS缓冲液中，调pH= 6.0 ~ 9.0，配制成胶体金-PD药物溶液，其中，PD药物与胶体金的质量比为m_PD药物：m_胶体金=（10：1）~（20：1），胶体金与大豆卵磷脂的质量比为m_胶体金：m_{大豆卵磷脂}=（1：1200）~（1：2000）；

(2) 按上述比例取胶体金-PD药物溶液于烧杯中，置于40~60℃水浴中，然后缓缓搅拌，边搅拌边将卵磷脂和胆固醇的无水乙醇溶液匀速滴入烧杯，滴加完后，保温继续缓缓搅拌，或转移至旋转蒸发仪中，减压恒温蒸发，直至乙醇完全挥发，将脂质体悬浮液水浴超声处理5~20 min，得到淡粉色脂质体悬浮液；

(3) 用去离子水分别配制蔗糖质量（克）：水体积（毫升）分别为1%、3%、5%的蔗糖溶液，取等量的不同浓度的蔗糖溶液按从浓到稀的顺序依次沿离心管内壁缓缓注入离心管，加注完成后，在不同浓度的蔗糖溶液之间看到折光率不同的界面，将少量制备好的金标记装载有PD药物的纳米脂质体悬浮液慢慢注入离心管使其平铺于蔗糖溶液上方，将离心管置于低温超速离心机中，离心，转速6500 rpm，时间 25min，离心后，胶体金标记的装载PD药物纳米脂质体在蔗糖溶液中分层明显，去除上清液，吸取悬浮液中层，再将其置于棕色瓶中，充N₂密闭，放入冰箱4℃保存，备用。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（1）中，m_{大豆卵磷脂}：m_胆固醇 = 8：1，m_L-dopa：m_胶体金：m_{大豆卵磷脂}= 20：1：2000。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（1）中，m_{大豆卵磷脂}：m_胆固醇 = 8：1，m_{盐酸金刚烷胺}：m_胶体金：m_{大豆卵磷脂}= 20：1：1200。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（1）中，PBS缓冲液pH=7.4。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（2）中，水浴温度为45~55℃，水浴超声处理时间10 min。