[发明专利]高质量交联透明质酸钠凝胶及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高质量交联透明质酸钠凝胶及其制备方法。

背景技术

中国专利文献CN 102731801 B（申请号 201210245094.X）公开了一种外科整形用交联透明质酸钠凝胶及其制备方法，制备时将透明质酸钠干粉分散在由10 wt%～20 wt%的氢氧化钠水溶液与丙酮组成的混合溶液，然后向所得的透明质酸钠碱性混悬液中加入交联剂1,4-丁二醇二缩水甘油醚，混匀后在搅拌状态下将反应物料于35℃～50℃保温5～8小时；过滤除去液体，剩余的物料用丙酮洗涤至GC-MS检测BDDE含量低于2ppm，然后将洗涤后的物料真空干燥得交联透明质酸钠粉末，粉末过筛后，将过筛的粉末收集，依次用去离子水和PBS纯化，然后依次用两种规格的筛网筛分而得到3种规格的凝胶，分别收集3份凝胶沉淀，消毒后灌装于事先灭菌的一次性注射器中。

按照上述制备方法，实际生产中对制得的交联透明质酸钠凝胶进行检测时，发现有些批次的蛋白质指标超标，不符合国标规定的使用要求，这些批次的产品弃之。

但是上述制备过程中，没有向反应体系外加蛋白质，交联反应过程也不会生成蛋白质，说明在交联反应过程中生成了“假蛋白”，这些“假蛋白”干扰了蛋白质的检测过程，影响了蛋白含量检测结果。因此为了进一步提高交联透明质酸钠的质量，需要去除这些假蛋白。

另外，发现最后用筛网筛分得到3种规格的凝胶中，放置一段时间后，在各种外力作用下小凝胶颗粒会聚集变成大凝胶颗粒，然后随着时间的推移及各种外在因素大颗粒又会变成小颗粒，凝胶颗粒大小不是很稳定。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种高质量交联透明质酸钠凝胶的制备方法。

实现本发明第一目的的技术方案是一种高质量交联透明质酸钠凝胶的的制备方法，包括以下步骤：

①将透明质酸钠干粉分散在由10 wt%～20 wt%的氢氧化钠水溶液和丙酮组成的混合溶液后获得透明质酸钠碱性混悬液，然后向透明质酸钠碱性混悬液中加入交联剂1,4-丁二醇二缩水甘油醚BDDE，混匀后获得反应物料，从而开始发生生成交联透明质酸钠的反应；搅拌状态下将反应物料于35℃～50℃保温5～8小时后反应结束，用浓盐酸调节反应后固液混合物料的pH值至7；其中所述反应物料中透明质酸钠的浓度为2 wt%～5wt%，交联剂与透明质酸钠的质量比为（1∶1.3）～（1∶1.8）。

②将步骤①反应后的pH=7的固液混合物料过滤以除去液体，剩余的物料用丙酮洗涤至GC-MS检测BDDE含量低于2ppm，然后将洗涤后的物料真空干燥获得水不溶性白色干粉即交联透明质酸钠粉末。

③将步骤②真空干燥获得的交联透明质酸钠粉末过筛分离，收集过筛的粉末。

④将步骤③收集的过筛粉末用二甲基亚砜洗涤2～6次。

⑤将步骤④经DMSO洗涤后的粉末用乙醇洗涤2～6次。

⑥将步骤⑤经乙醇洗涤后的粉末真空干燥获得水不溶性白色干粉即交联透明质酸钠粉末。

⑦向步骤⑥真空干燥获得的交联透明质酸钠粉末中加入去离子水，使得交联透明质酸钠粉末充分溶胀，在室温15℃～35℃纯化6～10小时后，收集凝胶颗粒得到交联透明质酸钠凝胶。

⑧向步骤⑦收集的凝胶中分别加入等渗PBS缓冲液，于室温15℃～35℃纯化6～10小时后，过滤除去PBS，收集凝胶；将凝胶依次用第一种规格和第二种规格的筛网分筛而获得3份不同平均粒径的凝胶。

⑨将步骤⑧收集的3份凝胶分别送入高速分散机中进行匀质微化处理，获得3份不同规格的交联透明质酸钠凝胶。

上述步骤④用二甲基亚砜洗涤时，第一次洗涤时，向每30g过筛粉末中加入DMSO直至浸没过筛粉末，将过筛粉末与DMSO搅拌2～3小时后静置，粉末沉降后倒掉DMSO完成一次洗涤操作；向第一次洗涤后的粉末中倒入新鲜的DMSO直至浸没过筛粉末，开始第二次洗涤，第3至第6次的洗涤操作同第一次。

上述步骤④每30g过筛粉末的二甲基亚砜洗涤过程总共消耗1.5L～5L的二甲基亚砜。

上述步骤⑤用乙醇洗涤时，第一次洗涤时，向每30g经DMSO洗涤后的粉末中加入无水乙醇直至浸没粉末，将粉末与无水乙醇搅拌1.5～2.5小时后静置，粉末沉降后倒掉乙醇完成一次洗涤操作；后续第2次至第6次的洗涤操作同第一次。

优选的，步骤⑤每30g经DMSO洗涤后的粉末的洗涤过程总共消耗1.5L～5L的无水乙醇。