[发明专利]一种酸酶结合法水解黄酒糟的方法

权利要求书

1.一种酸酶结合法水解黄酒糟的方法，其特征在于：其包括如下步骤：

(1)烯酸水解

称取10.0g的黄酒糟，加入浓度为4％的盐酸50ml，再加入水，定容至100ml；在温度80℃～90℃的条件下，酸解5～7h，水解液变成黄色，黄酒糟变成糊状；

(2)pH值调整

使用浓度为0.5～1mol/L的NaOH溶液进行pH值的调节，使得pH值调节至5～7；

(3)蛋白酶水解

向步骤(2)中加入占步骤(2)总重量1％的蛋白酶，在温度50℃～60℃的条件下，酶解18～20h，使得水解液的氮游离率达到42～46％。

2.根据权利要求1所述的酸酶结合法水解黄酒糟的方法，其特征在于：其包括如下步骤：

(1)烯酸水解

称取10.0g的黄酒糟，加入浓度为4％的盐酸50ml，再加入水分，定容100ml；在温度85℃的条件下，酸解6h，水解液变成黄色，黄酒糟变成糊状；

(2)pH值调整

使用浓度为1mol/L的NaOH溶液进行pH值的调节，使得pH值调节至6.5；

(3)蛋白酶水解

向步骤(2)中加入占步骤(2)总重量1％的蛋白酶，在温度55℃的条件下，酶解18h，使得水解液的氮游离率达到44.9％。

3.根据权利要求1所述的酸酶结合法水解黄酒糟的方法，其特征在于：所述步骤(3)中的蛋白酶，其为风味蛋白酶、或中性蛋白酶、胰蛋白酶中的一种与风味蛋白酶的组合，或者三者组合。

4.根据权利要求1所述的酸酶结合法水解黄酒糟的方法，其特征在于：所述的步骤(3)，其还包括如下步骤：

(31)胰蛋白酶的制备

(331)取动物胰脏，进行组织破碎，加入5～7倍体积的三氯乙酸提取液，提取10～12h；提取后的样品进行离心，收集上清液体；再加入盐析沉淀剂进行沉淀，至沉淀不再析出，得到的沉淀即为粗酶原I；

(332)用磷酸缓冲液溶解粗酶原I，用超滤膜超滤，从超滤开始随时监测透过液A₂₈₀值，至A₂₈₀<0.5时停止超滤，浓缩样品至提取剂体积的1/10左右，得到粗酶原II；

(333)滤液中加入硫酸铵，使硫酸铵的饱和度达到50～80％，静置，过滤，留取滤饼；所得滤饼加水溶解，加入饱和硫酸铵溶液，调节pH值至4.0～5.5；溶液静置至有针状糜蛋白酶结晶析出；离心，调节pH值至2.0～5.0，在溶液中加入固体硫酸铵，抽滤；取沉淀物，干燥，即得胰蛋白酶。

5.根据权利要求4所述的酸酶结合法水解黄酒糟的方法，其特征在于：所述的步骤(331)中的盐析沉淀剂，其为溶解度超过200g/L的无机盐，或pH<3的酸。

6.根据权利要求4所述的酸酶结合法水解黄酒糟的方法，其特征在于：所述的步骤(331)为采用盐析沉淀剂，进行分级沉淀处理，该分级沉淀处理为在上清液中依序加入20％、40％浓度的盐析沉淀剂进行分级沉淀。

7.根据权利要求4所述的酸酶结合法水解黄酒糟的方法，其特征在于：所述的步骤(332)中采用的超滤膜为3k～10k的超滤膜。