[发明专利]杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体以及该单克隆抗体的应用有效
申请号: | 201410148949.6 | 申请日: | 2014-04-14 |
公开(公告)号: | CN103966172B | 公开(公告)日: | 2017-07-04 |
发明(设计)人: | 任发政;任倩然;张昊;郭慧媛;姜鹭 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/18;G01N33/68;G01N33/577;C12R1/91 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司11283 | 代理人: | 李婉婉,张苗 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 杂交瘤 细胞株 及其 分泌 单克隆抗体 以及 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种杂交瘤细胞株,该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体,以及该单克隆抗体的应用。
背景技术
牦牛奶是我国青海地区人民的重要经济及食物来源,由于其富含共轭亚油酸、蛋白质、乳糖、乳钙、乳铁蛋白、免疫球蛋白及维生素等天然营养物质,被誉为“超级能量食物”,因此,牦牛奶及其乳制品在近几年越来越多的受到人们的关注。
然而,牦牛是青藏高原独有的物种,主要分布在亚洲中部2500-5500米高度的山区。由于受自然生态条件和放牧管理等条件的制约,牦牛奶的产量非常有限。由此催生了向牦牛奶制品中掺入传统牛奶的掺假行为。
由于牦牛奶和牛奶的化学同源性较强,理化性质差别较小,因此,仅通过简单的化学分析测定很难区分。为了检测掺入牦牛奶中的传统牛奶,需要特异性区别牦牛奶和传统牛奶乳源性的方法。
目前,国内外检测奶及奶制品掺假的方法综合起来可分为非免疫学方法和免疫学两大类。非免疫学方法主要包括电泳技术(聚丙烯酰胺凝胶电泳,等电点聚焦以及毛细管电泳等),色谱技术(高效液相色谱技术等),PCR技术。色谱、各种电泳和PCR等技术,其结果虽然准确可靠,但对仪器技术的依耐性强,仪器复杂且成本较高,不适合日常分析检测。而免疫学方法尤其是酶联免疫吸附方法,虽然对设备的要求较低,并且分析时间较短、费用较低、具有良好的特异性和灵敏性等。但现有的免疫技术却不能有效的检测上述的牦牛奶的掺假行为。
因此,亟需找到一种快速检测牦牛奶中是否掺杂传统牛奶的方法,以保证牦牛奶的质量。
发明内容
本发明的目的是为了克服上述缺陷,提供一种杂交瘤细胞,该杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体,以及该单克隆抗体的应用。
为了实现上述目的,本发明提供了一种杂交瘤细胞株,其中,该杂交瘤细胞株的保藏号为CGMCC NO.8785。
第二方面,本发明还提供了如上所述的杂交瘤细胞株分泌得到的单克隆抗体。
第三方面,本发明还提供了如上所述的单克隆抗体在检测传统牛乳特异性β-酪蛋白或奶制品中是否掺入有传统牛奶的方法中的应用。
第四方面,本发明还提供了如上所述的单克隆抗体在制备用于检测传统牛乳特异性β-酪蛋白或奶制品中是否掺入有传统牛奶的产品中的应用。
第五方面,本发明还提供了一种检测掺入了传统牛奶的奶制品的方法,其中,该方法包括:利用如上所述的单克隆抗体根据ELISA的方法对奶制品进行检测。
优选地,该方法还包括:检测前,将所述单克隆抗体与待测样品进行接触,得到混合液。
本发明的杂交瘤细胞产生的单克隆抗体能够表现出较高的效价,并且与牦牛乳无交叉反应,对传统牛奶中的β-酪蛋白具有高度的特异性,因此,使用本发明的单克隆抗体能够快速有效地鉴定在稀有奶制品掺入传统牛奶的掺假行为。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
生物保藏
本发明的杂交瘤细胞株为单克隆抗体杂交瘤细胞株,具体为小鼠杂交瘤细胞株(Mouse Hybridoma),于2014年1月24日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(缩写为CGMCC,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮政编码:100101),保藏编号为CGMCC No.8785。
附图说明
附图是用来提供对本发明的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与下面的具体实施方式一起用于解释本发明,但并不构成对本发明的限制。在附图中:
图1是牛乳特异性β-酪蛋白的浓度和吸光度值的曲线图。
图2是传统牛奶的稀释度和吸光度值的曲线图。
图3是牦牛奶的稀释度和吸光度值的曲线图。
图4是掺入不同含量的传统牛奶的牦牛奶和吸光度值的曲线图。
图5是不同热处理以及未经热处理的乳制品与吸光度的曲线图。
图6是不同酸处理以及未经酸处理的奶制品和吸光度的曲线图。
图7是经凝乳酶处理以及未经凝乳酶处理的乳制品和吸光度的曲线图。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明,并不用于限制本发明。
一方面,本发明提供了一种杂交瘤细胞株,其中,该杂交瘤细胞株的保藏号为CGMCC NO.8785。
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