[发明专利]一种模拟移动床色谱从丹参粗提物中提纯丹参酮IIA的方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然植物有效组分的提纯方法，尤其是一种三带模拟移动床色谱提纯丹参酮IIA的的方法。

背景技术

丹参酮IIA是丹参的有效成分之一，具有非常广阔的临床应用前景，除了传统的活血调经、祛瘀止痛、养心安神之功效外，近年药理研究表明丹参酮IIA还具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抑菌、保肝及降低血液粘度、抑制凝血、促进纤溶、抑制血小板聚集、延长血栓形成及促进血栓溶解，调节机体免疫功能，改善抗糖尿病微血管并发症等药理活性（时珍国医国药.2010，21：7，1770-1772）。

丹参酮IIA是丹参的脂溶性成分。除丹参酮IIA之外，丹参的脂溶性成分中还有其它的丹参酮型的二萜类化合物，如：丹参酮I、丹参酮IIB、隐丹参酮、羟基丹参酮、丹参羟甲酯、二氢丹参酮I，以及异丹参酮I、异丹参酮II、异隐丹参酮、二氢异丹参酮I等。

目前，获得高纯度（高于90%）丹参酮IIA单体的主要技术有：超临界二氧化碳萃取法，高速逆流色谱法，制备液相色谱法。

中国专利公开（公告）号：CN1369485，给出了“一种超临界二氧化碳萃取精制丹参酮IIA的方法”，采用超临界CO₂从丹参中萃取丹参酮IIA，一次性进行萃取和分离精制，具有无毒、快速、价廉、低温操作、符合环保要求等优点，但提取高纯度（高于90%）丹参酮IIA单体时，收率低。

高速逆流色谱法不需使用固体填料，应用两相互不混溶的溶剂系统在支撑管内高速行星运动来分离天然产物，中国专利公开（公告）号：CN1337397，“应用高速逆流色谱分离纯化丹参酮的方法”中溶剂体系为正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，经二次HSCCC色谱仪分离后获得丹参酮IIA，每次分离时间需要5～6小时，分离时间长；中国专利公开（公告）号：CN1394870，“一种分离纯化丹参酮的方法”的溶剂体系为石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，采用HSCCC色谱仪，一次分离可得隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA，但获得丹参酮IIA的时间8～9小时，仍很长；Min Zhang等，在“Development of a strategy and process parameters for a green process in counter-current chromatography:Purification of tanshinone IIA and cryptotanshinone from Salvia miltiorrhiza Bunge as a case study”（Journal of Chromatography A,2011,1218:6031–6037）一文中用正己烷-二氯甲烷-甲醇-水，及正己烷-乙醇-水的二次逆流色谱法（CCC）提取丹参酮IIA，分离时间缩短，产品纯度高，但收率很低。虽然高速逆流色谱法无不可逆吸附，但或者分离时间长，或者回收率低，效率尚需进一步提高。

在制备液相色谱法中，中国专利公开（公告）号：CN101210041，给出“一种丹参酮ⅡA化学对照品的分离制备方法”，以重量含量50～97%丹参酮IIA提取物为原料，以甲醇-水溶液为洗脱液，以C8或C18键合填料为固定相提纯丹参酮ⅡA化学对照品；中国专利公开（公告）号：CN1670019，提出的“一种丹参酮的提取方法”将丹参的醇提取液加至大孔吸附树脂柱上，分别采用一定浓度的醇梯度洗脱，得到提取物中丹参酮IIA；中国专利公开（公告）号：CN101200490，“高纯度丹参酮ⅡA的制备方法”主要将丹参总酮原料采用正相层析（以硅胶或氧化铝为固定相，石油醚/二氯甲烷为流动相），通过多功能层析系统进行分离，洗脱液浓缩，重结晶，得高纯度丹参酮IIA。这些柱色谱法都为批处理工艺，洗脱剂耗量大，不能连续自动生产。

模拟移动床色谱在制备色谱的基础上，引进了连续、逆流、精馏的运行机制，使色谱分离由间歇工作变为连续运行，能够进行自动化、规模化、高效分离，是提纯化合物的有效手段。目前尚未发现模拟移动床色谱技术分离提纯丹参酮IIA的报道。

发明内容

本发明提供了一种三带模拟移动床色谱提纯丹参酮IIA的方法，可以连续、自动、高效地提纯丹参酮IIA。

本发明提供的一种三带模拟移动床色谱提纯丹参酮IIA的方法，利用模拟移动床色谱简称SMBC从丹参粗提物中提纯丹参酮IIA，该方法的内容如下：

（1）SMBC设备

包括3～10根色谱柱、洗脱带流动相输送泵、精制带流动相输送泵、进料液输送泵、阀、多通、连接管线和储液罐；

色谱柱的固定相使用十八烷基硅烷键合硅胶ODS，10～60μm；