[发明专利]鉴别胃癌的血浆microRNA标志物的筛选与应用

权利要求书

1.一种用qRT-PCR检测microRNA的数据归一化方法，其特征在于：以cel-miR-39作为外参，同时以miR-16作为内参，取二者的平均值，对待测microRNA数据进行归一化处理；其中，cel-miR-39的序列如SEQ ID NO：1所示，hsa-miR-16的序列如SEQ ID NO：2所示。

2.一种根据权利要求1所述的方法筛选得到的检测胃癌的microRNA生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为序列如SEQ ID NO：3所示的hsa-miR-101、序列如SEQ ID NO：4所示的hsa-miR-19b、序列如SEQ ID NO：5所示的hsa-miR-671-5p中的任意一种。

3.一种如权利要求2所述的检测胃癌的microRNA生物标志物在制备胃癌的诊断试剂中的用途，其特征在于，所述生物标志物为序列如SEQ ID NO：4所示的hsa-miR-19b或序列如SEQ ID NO：5所示的hsa-miR-671-5p。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述has-miR-19b用于诊断和筛查晚期或低分化胃癌；所述hsa-miR-671-5p用于诊断和筛查较早期或高分化胃癌。

5.一种如权利要求2所述的检测胃癌的microRNA生物标志物在制备胃癌的预后诊断试剂中的用途，其特征在于，所述生物标志物为序列如SEQ ID NO：3所示的hsa-miR-101；所述hsa-miR-101用于区分术前和术后胃癌患者。

6.一种用于检测胃癌的诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括特异性检测如权利要求2所述microRNA生物标志物的试剂。

7.如权利要求6所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：Applied Biosystems公司的逆转录预混液：SKU为4366596的TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Kit；颈环逆转录引物、TaqMan探针、以及qPCR引物：SKU为4427975的TaqMan microRNA assay；以及Promega公司的qPCR预混液：GoTaq Probe qPCR Master Mix。