[发明专利]抑制MGC-803细胞的手型金纳米团簇的制备及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及药物技术领域的制备和生物医学应用，具体涉及一种抑制MGC-803细胞的手型金纳米团簇的制备及其用途。

背景技术

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，在我国其发病率居各类肿瘤的第二位，死亡率极高。早期胃癌多无症状或仅有轻微症状，当临床症状明显时，病变多已属晚期。因此，及时诊断出胃癌的早期症状，及时就医，对胃癌的诊疗具有非常重要的意义。近年来纳米技术以及纳米材料的应用为靶向识别以及治疗体内肿瘤提供了很好的方法。目前肿瘤临床诊治的主要问题是：肿瘤的诊断与治疗分离，绝大部分抗癌药物不能有效区分肿瘤细胞和正常细胞，结果带来了系统性的毒性和其它副作用。虽然现在纳米靶向药物递送系统的研究发展很快，但普遍存在探针构建复杂，重复性不稳定等缺点。

近年来，金纳米团簇的可控制备以及生物医学应用受到越来越多的重视，Rongchao Jin等通过动力学和热力学的条件控制，精确可控合成Au25金纳米簇(Wu，Z.，MacDonald，M.A.，Chen，J.，Zhang，P.，&Jin，R.(2011).Journal of theAmerican ChemicalSociety，133(25)，9670-9673)；此外JianpingXie等人利用牛血清白蛋白BSA作为模板，37℃的碱性水溶液中合成了高量子产率的金纳米团簇(Xie，J.，Zheng，Y.，&Ying，J.Y.(2009).Journal of the American Chemical Society，131(3)，888-889)。LiShang在Nano Today上发表的综述文章指出金纳米团簇由于具有超小的粒径，很好的生物相容性以及优异的光稳定性等优点，在超灵敏生物分子检测、生物体系荧光标记以及其他生物医学领域具有重大的潜在应用价值。经检索发现在现有的技术中，尽管有很多利用生物分子如蛋白质和核酸作为保护剂来合成荧光金纳米团簇的文献很多，但目前还没有采用自然界不常见的D构型的谷胱甘肽分子来合成荧光发射峰在650纳米的金纳米团簇的报道。经检索发现在现有的技术中，尽管有报道使用D构型的谷胱甘肽分子合成CdTe(碲化镉)量子点，但由于Cd元素的重金属毒性，严重限制了其在生物体系中的应用，而我们合成的金纳米团簇没有引入任何有毒的元素与物质，其中金元素具有很好的生物相容性。D构型的谷胱甘肽分子合成的金纳米簇比生物体系中普遍存在的L构型的谷胱甘肽分子合成的金纳米团簇更有效的抑制胃癌细胞MGC-803的生长与增殖，并显著促进MGC-803细胞的死亡，这种抑制作用在正常的胃粘膜上皮细胞GES-1中却几乎没有，因此，制备的D构型的谷胱甘肽分子合成的金纳米簇具有特异性的抑制胃癌肿瘤细胞MGC-803的作用，是一种有应用前景的治疗胃癌的纳米材料。

发明内容

本发明的目的在于针对上述现有技术存在的不足，提供一种抑制MGC-803的手型金纳米团簇的制备及其用途。具体涉及一种以D构型的谷胱甘肽分子包裹的手型金纳米团簇的合成，以及作为纳米探针特异性的对胃癌细胞MGC-803进行杀伤治疗的用途。

为实现上述目的，本发明是采用以下技术方案实现的：

第一方面，本发明涉及一种抑制MGC-803的手型金纳米团簇的制备方法，所述方法包括如下步骤：

A、将摩尔比为1∶3的氯金酸和D-GSH置于超纯水中，经室温混合和搅拌，置于冰浴中冷却至0℃，形成白色悬浊液；

B、在所述白色悬浊液中快速加入四丁基硼氢化铵溶液，并冰浴剧烈搅拌，形成含有D-GSH包裹的金纳米团簇的溶液；

C、离心去除步骤B所得溶液中的不溶物，上清液中的金纳米团簇通过加入过量的冷的乙醇加以沉淀，然后离心收集金纳米团簇，重复乙醇沉淀步骤若干次，冷冻干燥，即得所述手型金纳米团簇固体。

优选地，步骤A中，所述氯金酸溶液的浓度为10mM，D-GSH的浓度为150mM；所述混合和搅拌的时间为20分钟。

优选地，步骤B中，所述四丁基硼氢化铵与氯金酸的摩尔比为5∶1。

优选地，步骤B中，剧烈搅拌速度为1200～2000rpm，搅拌时间为1～4小时。

优选地，步骤C中，所述沉淀具体为：用3倍体积于金纳米团簇上清液的冷的乙醇沉淀，并10000rpm离心15分钟。

第二方面，本发明还涉及一种上述的方法制得的手型金纳米团簇在用作特异性抑制胃癌细胞MGC-803生长与增殖的纳米探针中的用途。