[发明专利]一种制备扇贝裙边活性肽的方法

权利要求书

1.一种制备扇贝裙边活性肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)匀浆：将经验收合格的扇贝裙边清洗后打浆，之后放入匀浆机进行匀浆；

(2)复合酶解：先用中性蛋白酶对步骤(1)得到的原料进行水解，水解完成后再调节PH值用碱性蛋白酶水解；

(3)灭酶：水解结束后，过滤，将滤液高温瞬时加热灭酶；

(4)脉冲电场纯化：将步骤(3)得到的原料放入强脉冲电场中进行纯化；

(5)超滤：将步骤(4)得到的原料进行超滤；

(6)混合床脱盐：将步骤(5)得到的超滤酶解液进行混合床脱盐；

(7)色谱分离：将步骤(6)得到的原料进行色谱分离纯化；

(8)真空浓缩：将步骤(7)得到的色谱分离物在80～90℃下进行真空浓缩；

(9)真空冷冻干燥：将步骤(8)得到的真空浓缩物进行真空冷冻干燥；

(10)载物、压片：取经纯化、冷冻干燥后的壳聚糖和壳聚糖/明胶水凝胶，与步骤(9)得到的真空冷冻干燥物充分混匀，用压片机制成成品；

所述步骤(1)中的匀浆操作后匀浆液颗粒粒度小于3um；

所述步骤(2)中的中性蛋白酶为N120P、碱性蛋白酶为Alcalase；

所述步骤(3)中的高温瞬时加热条件为95～100℃，加热时间2分钟；

所述步骤(4)中的脉冲电场强度为5～15Kv/cm，脉冲频率为2500～3500Hz，处理时间为200～400us；

所述步骤(5)中选用MWCO为1KD的超滤膜；

所述步骤(6)中混合床脱盐技术条件为阴离子∶阳离子＝3∶2，过柱速度：5倍柱体积/小时，水解液pH值4.5；

所述步骤(7)中色谱分离条件为：色谱柱，PhecdaC18柱；上样量：1mL；流速：4mL/min；检测波长：280nm和220nm；洗脱条件：0～3min，100％A；3～50min，0％～50％B；50～52min，50％～100％B；52～58分钟，100％B；58～60分钟，100％B～100％A，所述A为5％乙腈和0.05％三氟乙酸，所述B为80％乙腈和0.05％三氟乙酸；

所述步骤(9)中真空冷冻干燥温度为-30℃。