[发明专利]一种糖化酶的发酵培养基及其发酵方法

权利要求书

1.一种糖化酶的发酵培养基，所述发酵培养基为每1L水中含葡萄糖80～100g、有机氮与无机氮混合氮源61～63g，pH为5.3～5.5；

所述有机氮为玉米浆与黄豆饼粉，无机氮为硝酸盐，所述玉米浆、黄豆饼粉与硝酸盐的质量比为30：30：1～3。

2.根据权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于：所述玉米浆为工业级玉米浆，玉米浆浓度为36～40%，玉米浆蛋白质含量为38～42%。

3.根据权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于：所述黄豆饼粉为冷榨黄豆饼粉，黄豆饼粉粒度为80～100目，黄豆饼粉蛋白质含量为42～46%，黄豆饼粉水分为8～12%，黄豆饼粉酸价小于4（KOH）/（mg/g）。

4.根据权利要求3所述的发酵培养基，其特征在于：所述黄豆饼粉粒度为80目。

5.一种糖化酶的发酵方法，其特征在于：所述发酵方法包括菌种活化步骤、种子培养步骤、糖化酶发酵步骤，所述糖化酶发酵步骤为将糖化酶生产菌的种子培养液接入权利要求1、2、3或4所述的发酵培养基中，在发酵65～75h时向发酵培养基中补料或不补料，发酵周期为7～8d；

所述发酵培养基为每1L水中含葡萄糖80～100g、有机氮与无机氮混合氮源61～63g，pH为5.3～5.5；

所述有机氮为玉米浆与黄豆饼粉，无机氮为硝酸盐，所述玉米浆、黄豆饼粉与硝酸盐的质量比为30：30：1～3；

所述补料为补加的葡萄糖为发酵培养基中初始葡萄糖质量的1/10、补加的无机氮为发酵培养基中初始有机氮质量的1/60。

6.根据权利要求5所述的发酵方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

①菌种活化：将糖化酶生产菌菌落接种于活化培养基中，培养2.5～3.5d得到活化培养液；

所述活化培养基为每1L水中含蔗糖30g、NaNO₃3g、K₂HPO₄1g、MgSO₄·7H₂O0.5g、KCl0.5g、FeSO₄0.01g、琼脂0.5g，pH为5.4；

②种子培养：将步骤①所得活化培养液接入种子培养基中，培养2.5～3d得到种子培养液；

所述种子培养基为每1L水中含淀粉120g、黄豆粉20g、玉米浆20g，pH为5.1～5.4，淀粉液化后DE值为18～25；

③糖化酶发酵：将步骤②所得种子培养液接入发酵培养基中，在发酵65～75h时向发酵培养基中补料或不补料，发酵周期为7～8d；

所述发酵培养基为每1L水中含葡萄糖80～100g、有机氮与无机氮混合氮源61～63g，pH为5.3～5.5；

所述有机氮为玉米浆与黄豆饼粉，无机氮为硝酸盐，所述玉米浆、黄豆饼粉与硝酸盐的质量比为30：30：1～3；

所述补料为补加的葡萄糖为发酵培养基中初始葡萄糖质量的1/10、补加的无机氮为发酵培养基中初始有机氮质量的1/60。

7.根据权利要求6所述的发酵方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

①菌种活化：将糖化酶生产菌菌落接种于活化培养基中，30～32℃培养2.5～3.5d，间歇摇动3～4次/d，每次摇动10～20转，得到活化培养液；

所述活化培养基为每1L水中含蔗糖30g、NaNO₃3g、K₂HPO₄1g、MgSO₄·7H₂O0.5g、KCl0.5g、FeSO₄0.01g、琼脂0.5g，pH为5.4；

②种子培养：将步骤①所得活化培养液接入种子培养基中，活化培养液与种子培养基的体积比为1：10，在30～32℃下190～210r/min培养2.5～3d，得到种子培养液；

所述种子培养基为每1L水中含淀粉120g、黄豆粉20g、玉米浆20g，pH为5.1～5.4，淀粉液化后DE值为18～25；

③糖化酶发酵：将步骤②所得种子培养液接入发酵培养基中，种子培养液与发酵培养基的体积比为1：10，在30～32℃下190～210r/min发酵，在发酵65～75h时向发酵培养基中补料或不补料，发酵周期为7～8d；

所述发酵培养基为每1L水中含葡萄糖80～100g、有机氮与无机氮混合氮源61～63g，pH为5.3～5.5；

所述有机氮为玉米浆与黄豆饼粉，无机氮为硝酸盐，所述玉米浆、黄豆饼粉与硝酸盐的质量比为30：30：1～3；

所述补料为补加的葡萄糖为发酵培养基中初始葡萄糖质量的1/10、补加的无机氮为发酵培养基中初始有机氮质量的1/60。