[发明专利]一种用于肾小球滤过膜修复的自组装多孔聚合物膜及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于生物功能材料制备技术的领域，特别涉及一种用于肾小球滤过膜修复的自组装多孔聚合物膜及其制备方法与应用。

背景技术

慢性肾病是肾损害或肾功能减退持续3个月以上，严重地导致尿毒症。慢性肾病发病率高，致残致死率高，治疗费用昂贵，严重影响人们的健康和生活，已成为当前重要的“全球公共健康问题”。蛋白尿是衡量肾小球损伤程度的重要指标,也是导致肾病变的主要因素。因此，减少或消除蛋白从细胞内漏出，是治疗肾病或修复肾脏的关键。目前，蛋白尿主要使用肾素-血管紧张素系统抑制剂、糖皮质激素等治疗， 但病情容易反复，且副作用很大。这些药物只是暂时控制表征，没有从根本上修复受损的肾小球滤过膜。

本发明合成的聚合物作为一种生物相容性的材料，在生物医学领域具有广泛的应用。然而，将其自组装成微米级下片状大小的膜和控制孔的大小在纳米级别内，具有很大的挑战性。本自组装多孔聚合物膜模拟肾滤过膜滤过膜屏障，具有生物相容性和一定的促进细胞生成作用。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种用于肾小球滤过膜修复的自组装多孔聚合物膜及其制备方法与应用。

一种用于肾小球滤过膜修复的自组装多孔聚合物膜，由聚合物自组装形成的，具有较高的比表面积和多孔。所述自组装多孔聚合物膜带有负电性和通透的多孔，所述自组装多孔聚合物膜的尺寸为80-10000 nm，所述自组装多孔聚合物膜上孔的尺寸为3-500 nm；所述自组装多孔聚合物膜上连接有肾小球滤过膜上的nephrin的抗体（anti-nephrin）；所述的膜具有肾小球滤过膜靶向性。所述的自组装多孔聚合物膜能够模拟胞外基质，作为一种物理生物的过滤屏障，能减少蛋白尿的产生，促进肾滤过膜的自我修复，进而达到滤过膜的修复。

一种用于肾小球滤过膜修复的自组装多孔聚合物膜的制备方法，包括如下步骤：

（1）加入引发剂和有机酯，并用氮气去除反应瓶中的空气后密封，在100-200 ℃下搅拌反应10-30小时，得到材料a；所述引发剂与有机酯摩尔比为1：300-6000；

（2）将步骤（1）得到材料a用有机溶剂和醇分别溶解和沉淀，如此反复2-6次后；在10-100 ℃真空干燥2-20小时，得到中性的聚合物微粒；

（3）将聚合物微粒溶于有机溶剂中，并加入有机酸酐，在20-150 ℃下搅拌反应2-20小时，得到负电荷的聚合物微粒；所述聚合物微粒与有机酸酐的摩尔比为1：1-100；

（4）将负电荷的聚合物微粒按照0.001-4%（wt/v%）溶于有机溶剂中，在20-80 ℃加入0.005-4倍体积有机溶剂的有机醇，后淬冷，于蒸馏水中交换溶剂，自组装得到负电荷的自组装多孔聚合物膜；

（5）将负电荷的自组装多孔聚合物膜分散到去离子水中，根据经典的EDC与NHS偶联羧基和氨基法接上肾小球滤过膜上的nephrin的抗体（anti-nephrin），得到用于肾小球滤过膜修复的自组装多孔聚合物膜；所述的负电荷的自组装多孔聚合物膜与anti-nephrin的摩尔比为1：1-20

（6）将接上抗体的自组装多孔聚合物膜分散在生理盐水中，通过静脉注射进入到大鼠体内；跟踪监测大鼠尿蛋白和肾小球滤过膜和肾功能的治疗效果。

上述方法中，步骤（1）中所述引发剂包括甲醇、乙醇、乙二醇、丙三醇、丙二醇、异丙醇、丁醇、丁二醇、聚乙二醇、聚酰胺胺醇、聚丙烯胺醇中的一种以上；所述有机酯包括甲酯、乙酯、丁酯、乙酸乙酯、丙交脂、丙酯、乙酸丁酯中的一种以上。

上述方法中，所述有机溶剂包括丙酮、四氢呋喃、吡啶、一氯甲烷、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳和乙酸乙酯中的一种以上；所述醇包括甲醇、乙醇、丙醇、乙二醇、丙三醇、丙二醇、异丙醇、丁醇和已醇中的一种以上。

上述方法中，步骤（4）中所述有机酸酐包括乙酸酐、丙酸酐、丁酸酐、戊酸酐、已酸酐、乙二酸酐、丙二酸酐、丁二酸酐、戊二酸酐和已二酸酐中的一种以上。

上述方法中，步骤（6）的大鼠肾小球滤过膜和肾功能的检测包括尿蛋白、尿素氮、血肌酐的检测、组织免疫染色、podocin染色、肾小球滤过膜超微结构的电子显微镜观察。

一种用于肾小球滤过膜修复的自组装多孔聚合物膜应用于降低蛋白尿和修复肾滤过膜。