[发明专利]一种提取微藻中油脂的方法

说明书

技术领域

本发明属于微藻生物技术领域，具体涉及一种提取微藻中油脂的方法。

背景技术

化石燃料的日益枯竭及其带来的环境污染使人们将更多的目光投向了生物可再生能源。而粮食类的生物能源会加剧粮食匮乏的危机，所以作为非粮食作物的微藻获得人们的青睐。微藻可以生长在各种水域环境，尤其是咸水水域和污水水域，不仅不与粮食作物争抢土地，还能起到净化环境的作用，微藻生长速度快，含油量高，同时还含有丰富的蛋白和糖类，可作为理想的动物饲料原料。

 微藻中油脂的提取是生产生物柴油的关键步骤。目前采用的方法多为有机溶剂的提取，而多数的溶剂提取必须需要对微藻进行干燥。有机溶剂提取一般采用的溶剂为正己烷，甲醇/氯仿，乙醚，石油醚，乙醇，异丙醇等。除了常规的有机溶剂提取，还有超临界二氧化碳提取，液态二甲醚提取等，而这两种方法对提取设备以及人工操作有较高的要求。

中国专利CN102533430A提出了一种用甲醇和乙酸的混合液来提取油脂的方法。中国专利CN 102199482B提出了一种用纤维素酶和蛋白酶组成的混合酶处理产油微生物使其分解，然后再用有机溶剂进行油脂的萃取。中国专利CN101429467A提出了一种在湿藻中通入蒸汽使藻液形成溶浆，使细胞内的蛋白和油脂溶出，进而进行水提，可以分离出蛋白和油脂。在文献（Liu CZ, Zheng S, Xu L, Wang F, Guo C. Algal oil extraction from wet biomass of Botryococcus braunii by 1, 2-dimethoxyethane. Applied Energy. 2013,102: 971-974）中，作者提出了用1, 2-dimethoxyethane（二甲氧基乙烷）来提取布朗藻中的油脂，可以提取干藻和湿藻。在文献（Wang G, Wang T. Lipid and biomass distribution and recovery from two microalgae by aqueous and alcohol processing. Journal of the American Oil Chemists' Society 2012; 89(2):335-345）中，作者利用乙醇，在酶和超声的辅助下进行提取。在文献（Yao L, Gerde JA, Wang T. Oil extraction from microalga Nannochloropsis sp. with isopropyl alcohol. Journal of the American Oil Chemists' Society 2012; 89(12):2279-2287）中，作者提出了用异丙醇在来提取微藻中的油脂。

从目前公开报导的方法来看，提取油脂的方法存在提取不充分，步骤繁琐，成本过高，溶剂有一定的毒性以及环境污染等问题。

发明内容

本发明设计了一种提取微藻中油脂的方法，其解决了现有技术中提取油脂的方法存在提取步骤繁琐，成本过高，溶剂有一定的毒性以及环境污染等的问题。

为了解决上述存在的技术问题，本发明采用了以下方案：

一种提取微藻中油脂的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1、在密封反应器中，将微藻溶解于混合醇溶剂中，一边震荡，一边加热萃取得到提取液；

步骤2、将步骤1所得提取液进行离心分离以得到上清液，再用与步骤1中相同的混合醇溶剂将剩余渣滓洗涤多次并离心分离，将每次分离得到的液体与所述上清液汇合得到上清液汇合液；

步骤3、将步骤2中得到的上清液汇合液旋转蒸发以除去上清液汇合液中的混合醇溶剂，得到粗油脂；

步骤4、将步骤3中得到的粗油脂溶解到正己烷溶剂中以得到粗油脂溶液，将粗油脂溶液移至分液漏斗中，并加入去离子水或者中性盐溶液洗涤多次以除去粗油脂溶液中的水溶性物质，然后收集洗涤后的粗油脂溶液上层有机相并旋转蒸发除去正己烷溶剂，得到总油脂。

进一步，混合醇溶剂为甲醇和其他低碳醇中的一种或几种的混合液。

进一步，甲醇和其他低碳醇的体积比为1：10-10:1。

进一步，甲醇与其他低碳醇的体积比为0.5-2。

进一步，其他低碳醇包括乙醇或异丙醇。

进一步，步骤1中微藻是干藻或湿藻。

进一步，微藻为小球藻或金球藻或绿藻。

进一步，步骤1中加热萃取的温度是0-120℃。

进一步，步骤1中加热萃取的温度是40-70℃。