[发明专利]一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物菌种培养技术领域，具体涉及一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法。

背景技术。

在我国的城市内河，封闭水体，小流域都存在严重的水体富营养化污染，黑臭，异味，甚至蓝藻赤潮，在水体安全和人体健康方面造成了巨大的损害。氮、磷等营养物质过剩是引发水体黑臭富营养化的根本原因，当水体中N浓度>0.2mg/L，P浓度>0.02mg/L时就存在发生富营养化的可能性。由于我国城市管网规划的不全面，造成许多的城市内河都受到生活污水排放的影响变成臭水沟，失去自净能力。而生活污水是氮、磷等营养物质的最大排放源，因此如何解决黑臭水体的氮磷是生态修复城市内河，封闭水体，小流域的核心问题。目前使用的较多的有投加化学净水剂，外加菌种以及种植水生植物等方法。投加化学净水剂可以快速的降低水体里的磷含量，但是产生无机沉淀物，导致底泥状态恶化，产生二次污染，而且对氮没有作用；外加菌种，可以增加水体里脱氮除磷微生物的数量，但存在外来菌种对水体的适应和外来物种长期安全性的风险，而且成本较高，每平米水体外加菌种的费用在1-2元；种植具有解氮聚磷的水生植物，可以吸收利用水体中的氮磷，但是生长周期较长，并且需要及时收割，人工费用较高，作用有限。

鉴于上述问题，有必要培养一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌培育方法来解决上述问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌培育方法，以期有效解决黑臭水体中氮磷过剩的问题。

本发明的技术方案为：

一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法，包括以下步骤：

（1）菌种样品采集：分别采集市政污水处理厂的活性污泥与黑臭水体的底泥，放入恒温箱中待用，温度为28℃～35℃；

（2）扩增培养：在好氧条件下，向两种污泥样品中分别加入液体培养基进行恒稳培养，温度为28℃～35℃，培养时间为2～3天；

（3）筛选驯化菌种：将两种污泥混合液按照1～3:1混合加入筛选驯化培养基中，在28℃～35℃温度下好氧振荡，2～3天为一个驯化周期，需要5-8个驯化周期；每个驯化周期结束后，取5-10mL培养液接种到新鲜的筛选驯化培养基中；

（4）纯化菌种：将筛选好的菌种接种到活化富集培养基中，在28℃～35℃温度，培养2-3天，用高速离心机离心处理，再用磷酸盐缓冲液清洗，再离心制成菌种悬浮液。

步骤（2）所述的液体培养基的配置比例为：1000mL培养基中加入K₂HPO₄0.0-1.5g、MgSO₄·7H₂O1-3g、牛肉膏1-3g、(NH₄)₂SO₄1-2g、NaH₂PO4·3H₂O1-2g、尿素0.2-0.3g、FeSO₄·7H₂O0.002-0.003g、MnSO₄·7H₂O0.003-0.004g、ZnSO₄·7H₂O0.003-0.004g、CoSO₄·7H₂O0.001-0.002g、葡萄糖15-16g，调PH值为7.0，并高压灭菌。

步骤（3）所述的筛选驯化培养基的配置比例为：1000mL培养基中加入黑臭水体的污水50-100g、K₂HPO₄1.5-2.5g、NaH₂PO₄·3H₂O1-2g、MgSO₄·7H₂O3-4g、、NH₄Cl2-3g、维生素B₁0.1-0.2g，调PH值为7.0，并高压灭菌。

步骤（4）所述的活化富集培养基的配置比例为：1000mL培养基中加入NH₄Cl2-3g,牛肉膏5-6g、葡萄糖15-16g、琼脂15-16g，调PH值为7.0，并高压灭菌。

经鉴定，所得菌种包含以下四种微生物：蜡状芽孢杆菌、脱氮副球菌、施氏假单胞菌、枯草芽孢杆菌。