[发明专利]用液相层析-质谱法分析体液内的氨基酸

权利要求书

1.一种定量来自人个体的体液样品中一种或多种游离氨基酸水平的方法，包含：

(a)衍生化所述样品内的一种或多种游离氨基酸；

(b)通过液相层析法(LC)分离该一种或多种衍生化游离氨基酸；和

(c)用质谱法(MS)分析，定量来自步骤(b)的一种或多种衍生化游离氨基酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种氨基酸包括选自下列的至少一种：磷酸丝氨酸、磺酸-半胱氨酸、磷酸乙醇胺、肌肽、鹅肌肽、1,3-甲基-组氨酸、L-别-胱硫醚-A、和DL-别-羟赖氨酸、精氨琥珀酸、羟脯氨酸、天冬氨酸、肌氨酸、α-氨基-己二酸、β-丙氨酸、脯氨酸、乙醇胺、γ-氨基-丁酸、β-氨基-异丁酸、半胱氨酸、L-胱硫醚、别-异亮氨酸、DL-羟赖氨酸、高胱氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、赖氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、色氨酸、组氨酸、丙氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸和hawkinsin。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种游离氨基酸包括选自下列的至少一种：酪氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、赖氨酸和组氨酸。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种游离氨基酸包括选自下列的至少一种：胱氨酸和谷氨酰胺。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种游离氨基酸包括选自下列的至少一种：色氨酸和组氨酸。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种游离氨基酸包括丙氨酸。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种游离氨基酸包括选自下列的至少一种：酪氨酸和苯丙氨酸。

8.根据权利要求1所述的方法，其中至少一种游离氨基酸用苯基异硫氰酸酯(PITC)、邻苯二醛(OPA)、2,4-二硝基氟苯(DNFB)或Nα(2,4-二硝基-5-氟苯基)-L-丙氨酰胺(FDAA)衍生化。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种游离氨基酸包括hawksinsin。

10.一种定量人个体体液内一种或多种游离氨基酸的方法，包括：

(a)衍生化所述体液内的一种或多种游离氨基酸，其中所述一种或多种游离氨基酸包括选自下列的至少一种：磷酸丝氨酸、磺酸半胱氨酸、磷酸乙醇胺、肌肽、鹅肌肽、1,3-甲基-组氨酸、L-别-胱硫醚-A和DL-别-羟赖氨酸；(b)通过液相层析法(LC)分离所述一种或多种衍生化游离氨基酸；

(c)用质谱法(MS)分析，定量来自步骤(b)的所述一种或多种衍生化游离氨基酸。

11.一种定量人个体体液中一种或多种游离氨基酸水平的方法，所述方法包括：

(a)衍生化所述体液内的一种或多种游离氨基酸，其中该一种或多种衍生化游离氨基酸包括选自下列的至少一种：磷酸丝氨酸、磺酸-半胱氨酸、精氨琥珀酸、羟脯氨酸、天冬氨酸、磷酸乙醇胺、肌氨酸、肌肽、鹅肌肽、1,3-甲基-组氨酸、α-氨基-己二酸、β-丙氨酸、脯氨酸、乙醇胺、γ-氨基-丁酸、β-氨基-异丁酸、半胱氨酸、L-别-胱硫醚-A、L-胱硫醚、胱氨酸、别-异亮氨酸、DL-羟赖氨酸、DL-别-羟赖氨酸和高胱氨酸；

(b)通过液相层析法(LC)分离所述一种或多种衍生化游离氨基酸；

(c)使用质谱法(MS)分析，定量来自步骤(b)的所述一种或多种衍生化游离氨基酸。

12.一种定量人个体唾液或脑脊髓液内一种或多种游离氨基酸的方法，包括：

(a)衍生化所述唾液或脑脊髓液内的一种或多种游离氨基酸；

(b)通过液相层析法(LC)分离所述一种或多种衍生化游离氨基酸；和

(c)使用质谱法(MS)分析，定量来自步骤(b)的一种或多种衍生化游离氨基酸。

13.一种定量人个体唾液或脑脊髓液中一种或多种游离氨基酸水平的方法，包括：

(a)衍生化所述唾液或脑脊髓液内的游离氨基酸；

(b)通过液相层析法(LC)分离衍生化游离氨基酸；和

(c)使用质谱法(MS)分析，通过与一系列游离氨基酸标准物进行比较，来定量来自步骤(b)的一种或多种衍生化游离氨基酸。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中量化至少20种衍生化游离氨基酸。

15.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中量化至少22种衍生化游离氨基酸。