[发明专利]一类微管蛋白抑制剂及其合成方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于化学制药技术领域，具体涉及一类三氟甲基二硝基二苯醚类衍生物的制备及其在制备肿瘤抑制药物方面的应用。

背景技术

微管蛋白是细胞内微管的基本结构单位，它具有α、β两种类型，具有维持细胞形态、分裂细胞、信号转导及物质转运等多种细胞功能。其主要作用是细胞分裂期形成纺锤体，因此，为阻止肿瘤细胞的过度分裂增殖，微管蛋白抑制剂成为一类重要的抗肿瘤治疗药物。以其为靶点开发的抗肿瘤药物更是种类繁多，如：秋水仙碱、鬼臼毒素、长春花碱、紫杉醇等。这些药物在微管蛋白的活性域有效地与微管蛋白结合，阻止微管蛋白的正常功能，进而阻止了肿瘤细胞的生长，达到抗肿瘤的目的。

二硝基苯胺类化合物是一类重要的微管蛋白抑制剂。 D.A.等于2006年在《Journal of Medicinal Chemistry》第49期p4196-4207页发表了“Activity of and Initial Mechanistic Studies on a Novel Antileishmanial Agent Identified through in Silico Pharmacophore Development and Database Searching”(通过硅片药效的发展和数据库搜索发现新颖的利什曼原虫制剂)，文中作者通过3D-QSAR模拟搜索和建模，并通过化学设计合成获得了系列苯基酰胺二硝基苯胺类活性分子，并通过活性验证发现了两个高活性分子，同时，该课题组又发表了多篇同类型研究，证明二硝基苯胺类活性分子具有典型的微管蛋白抑制活性。

而Dong J.J.等于2013年在《European Journal of Medicinal Chemistry》第70期p427-433页发表了“Synthesis,biological evaluation and molecular docking studies of flavone and isoflavone derivatives as a novel class of KSP(kinesin spindle protein)inhibitors”(一类新型纺锤体驱动蛋白抑制剂--黄酮和异黄酮衍生物的合成，生物评价和分子对接研究)，通过将黄酮及异黄酮与二硝基氯苯类反应，获得了新颖结构的活性分子，并通过蛋白抑制验证了该类活性分子的抗肿瘤活性功能。

这些研究结果均表明，含有二硝基苯单元活性分子是一类重要的抗肿瘤活性分子，由此，我们以微管蛋白为相应的靶点，设计了二苯基西弗碱类二苯醚类二硝基苯活性分子，并希望通过活性验证，证明我们实验思路的正确性。

发明内容

解决的技术问题：本发明提供一类微管蛋白抑制剂及其合成方法和其在肿瘤抑制方面的应用。本发明的抗肿瘤活性表明，3,4-二氟苯胺衍生物对癌细胞株A549、MG63和B16-F10具有明显的抑制活性，IC₅₀值分别达到了0.15，0.23和0.12μmol/mL。

技术方案：一类微管蛋白抑制剂，如式I所示：

其中，R为H、邻甲基、间甲基、对甲基、邻氯、间氯、对氯、邻氟、间三氟甲基、间2,4-二氟、间3,4-二氟或间溴间三氟甲基。

所述微管蛋白抑制剂的结构优选为：

制备所述微管蛋白抑制剂的方法，制备步骤为，按比例：取0.1mol香草醛和0.1mol相应取代的苯胺溶解在50mL乙醇中，于加热回流条件下至反应完全，并冷却结晶得纯品产物；取4-三氟甲基-3,5-二硝基氯苯0.01mmol和上步产物于20mL N,N-二甲基甲酰胺中，室温搅拌至反应完全，将反应体系倾倒入装有碎冰的烧杯中搅拌，至反应溶剂完全溶解在冰水中，抽滤至干，粗产物用乙醇重结晶得到目标产物。

所述加热回流温度为74-80℃。

所述微管蛋白抑制剂在制备治疗肿瘤药物中的应用。

有益效果：本发明微管蛋白抑制剂（式Ⅰ结构衍生物）是通过香草醛与苯胺类衍生物脱水制备的西弗碱与对三氟甲基二硝基氯苯反应制备获得新颖结构衍生物。本发明通过体外肿瘤细胞抑制活性证明三氟甲基二硝基二苯醚类活性功能分子是一类高效的抗肿瘤活性功能分子，其中3,4-二氟苯胺衍生物的活性明显，对A549、MG63和B16-F10具有明显的抑制活性，IC₅₀值分别达到了0.15，0.23和0.12μmol/mL，可用于制备治疗肿瘤药物。

附图说明

图1表示三氟甲基二硝基二苯醚类对肿瘤细胞A549的体外活性；