[发明专利]基于膜结构的血清(血浆)抗体筛查方法以及筛查检测试剂盒的制备

权利要求书

1.一种基于膜结构的血清(血浆)抗体筛查方法以及筛查检测试剂盒的制备，其特征在于，该方法选用能够允许单个红细胞通过的滤膜作为核心材料，将细胞、细胞碎片或者纯化抗原结合到滤膜上，滤膜的周边包围有吸水材料，检测时，将待检血清或血浆滴加到滤膜表面，孵育一定时间后，微量冲洗液冲洗后，再将特定的指示剂细胞滴加到滤膜表面，最后使用冲洗液冲洗。当膜上的抗原特异性结合血清(血浆)中抗体后，可以与特定的指示细胞发生红细胞凝集反应，进而形成肉眼可见的红色团块。当膜上的抗原不与血清(血浆)中抗体结合，指示剂细胞就不会发生凝集，红细胞会被冲洗液分散，没有肉眼可见红色聚集块。操作人员可依据红细胞是否在滤膜形成肉眼可见的红色团块来判断结果，确定血清或者血浆中的抗体。指示剂红细胞和膜结构的结合，为反应提供了结果显示的方式。

2.根据权利要求1所述的基于膜结构的血清(血浆)抗体筛查方法，其特征在于，所述血清(血浆)抗体包括血型抗体、HLA抗体、血小板抗体。

3.根据权利要求1所述的基于膜结构的血清(血浆)抗体筛查方法，其特征在于，所述该方法选用能够允许单个红细胞通过的滤膜作为核心材料，而滤膜材质可以是玻璃纤维膜或硝酸纤维膜或硅酸盐颗粒等能够形成特定连续液流通道的固体，且滤膜的内径在2-20微米之间。

4.根据权利要求1所述的基于膜结构的血清(血浆)抗体筛查方法，其特征在于，所述滤膜的周边包围有吸水材料，吸水材料可以是吸水纸、棉花等，吸水材料包围滤膜的方式为全部包围或者部分包围。

5.根据权利要求1所述的基于膜结构的血清(血浆)抗体筛查方法，其特征在于，所述将细胞、细胞碎片或者纯化抗原结合到滤膜上，将细胞、细胞碎片或者纯化抗原结合到滤膜上的方法为物理吸附法或者化学交联法。

6.根据权利要求1所述的基于膜结构的血清(血浆)抗体筛查方法，其特征在于，所述的待检血清或血浆滴加到滤膜表面，其中的待检血清或血浆为体积约10-200μL的新鲜的人血清或者血浆。

7.根据权利要求1所述的基于膜结构的血清(血浆)抗体筛查方法，其特征在于，所述的将特定的指示剂细胞滴加到滤膜表面，其中指示剂细胞为保存在红细胞保存液或其他等渗溶液中的抗人球蛋白包被的血红细胞。指示剂红细胞的制备可以依据红细胞致敏的方法制作。根据实验要求，指示剂细胞浓度在0.5％-20％之间。

8.用于完成根据权利要求1所述的基于膜结构的血清(血浆)抗体筛查方法的检测试剂盒，其特征在于，该检测试剂盒由检测卡以及指示剂细胞组成。其中检测卡内设有能够允许单个红细胞通过的滤膜，将细胞、细胞碎片或者纯化抗原结合到滤膜上，滤膜周边垫有吸水垫，吸水垫的面积要大于滤膜，且滤膜和吸水垫都通过塑料固体结构来做固定和支撑。而指示剂细胞则是抗人球蛋白包被的血红细胞。

检测时，将待检血清或血浆滴加到检测卡的滤膜表面，孵育一定时间后，微量冲洗液冲洗后，再将特定的指示剂细胞滴加到滤膜表面，最后使用冲洗液冲洗。如果血清或者血浆中含有与滤膜上抗原发生特异性反应的抗体，血清或血浆中抗体将被结合到滤膜上，进而与指示剂细胞发生抗原抗体结合，指示红细胞则会留在膜表面形成肉眼可见的红色团块；反之，如果血清或者血浆中不含与滤膜上抗原发生特异性反应的抗体，对应的反定型指示剂细胞不会发生抗原抗体结合，指示剂红细胞将会随冲洗液液体渗出，则滤膜上不会形成肉眼可见的红色团块。