[发明专利]利用PUFA聚酮化合物合成酶系统在异源的生物体中产生多不饱和脂肪酸的方法

权利要求书

1.分离的核酸分子，其包含对催化长链PUFA游离脂肪酸(FFA)转化成酰基辅酶A的酰基辅酶A合成酶(ACoAS)进行编码的核酸序列，其中所述核酸序列编码与具有选自以下的氨基酸序列的酰基辅酶A合成酶至少60%相同的酰基辅酶A合成酶(ACoAS)：SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:87、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:91、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:95、SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:99。

2.分离的核酸分子，其包含对在形成磷脂(PL)或三酰甘油(TAG)时使用PUFA-CoA作为底物的蛋白质进行编码的核酸序列，其中所述蛋白质包含与选自以下的氨基酸序列至少60%相同的氨基酸序列：SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:107、SEQ ID NO:110和SEQ ID NO:113。

3.重组核酸分子，其包含可操作地与表达控制序列相连的权利要求1或2的核酸分子。

4.重组宿主细胞，其包含权利要求3的重组核酸分子。

5.经遗传修饰的生物体，其中所述生物体已被遗传修饰来表达权利要求1或2的分离的核酸分子。

6.经遗传修饰的生物体，其中所述生物体对PUFA合成酶和磷酸泛酰巯基乙氨基转移酶(PPTase)进行表达，所述PUFA合成酶产生至少一种多不饱和脂肪酸(PUFA)，并且其中所述生物体含有对一种或多种催化长链PUFA游离脂肪酸(FFA)转化成酰基辅酶A的异源性酰基辅酶A合成酶(ACoAS)或其同源物进行表达的遗传修饰。

7.经遗传修饰的生物体，其中所述生物体对PUFA合成酶和磷酸泛酰巯基乙氨基转移酶(PPTase)进行表达，所述PUFA合成酶产生至少一种多不饱和脂肪酸(PUFA)，并且其中所述生物体含有由对所述生物体表达的脂肪酸合成酶(FAS)进行除去或钝化的遗传修饰。

8.经遗传修饰的生物体，其中所述生物体对PUFA合成酶和磷酸泛酰巯基乙氨基转移酶(PPTase)进行表达，所述PUFA合成酶产生至少一种多不饱和脂肪酸(PUFA)，并且其中所述生物体含有在所述生物体中就丙二酰辅酶A而言减少与PUFA合成酶的竞争或提高丙二酰辅酶A的水平的遗传修饰。

9.经遗传修饰的生物体，其中所述生物体对PUFA合成酶和磷酸泛酰巯基乙氨基转移酶(PPTase)进行表达，所述PUFA合成酶产生至少一种多不饱和脂肪酸(PUFA)，其中所述生物体含有对一种或多种来自内源性地产生PUFA的生物体的异源性蛋白质进行表达的遗传修饰，其中所述蛋白质在形成磷脂(PL)或三酰甘油(TAG)时使用PUFA-CoA作为底物。