[发明专利]雷帕霉素与环孢素A纳米口服微乳液制备方法

说明书

技术领域

本发明属于免疫抑制剂纳米口服药物制备研究领域，特别涉及一种微乳液方法制备雷帕霉素、环孢素A、雷帕霉素+环孢素A组合纳米口服溶液的方法。

背景技术

雷帕霉素（Rapamycin），是新型大环内酯的抗排斥药物，在生物体内的主要靶标蛋白是mTOR，是目前世界上最新的强效免疫抑制剂，临床上用于器官移植的抗排斥反应和治疗类风湿性关节炎、红斑狼疮等自身免疫性疾病的治疗。可能通过阻断IL-2启动的T细胞增殖而选择性抑制T细胞，用于抗移植排斥反应。通过与相应免疫嗜素RMBP结合抑制细胞周期G0期和G1期，阻断G1进入S期而发挥作用，其效应为：①抑制T和B细胞增殖；②抑制IL-1、IL-2、IL-6和IFN-γ诱导的淋巴细胞增殖；③抑制IgG和供者特异性抗体(细胞毒抗体)产生；④抑制单核细胞增殖。环孢素A由11个氨基酸组成的环状多肽组成，是一种选择性作用于T淋巴细胞的强效免疫抑制剂。通过与细胞内免疫嗜素亲环蛋白结合，抑制辅助性T细胞活化及对IL-2的反应性，主要用于预防移植术后的移植物抗宿主(GVH)反应，或治疗多种自身免疫病。临床上主要用于肝、肾以及心脏移植的抗排异反应，也可与肾上腺皮质激素同用，治疗免疫性疾病。雷帕霉素还具有抗肿瘤的作用,它通过与细胞内特异性亲和蛋白FKBP-12 结合形成RAP-FKBP-12 复合物并与其靶蛋白mTOR 的FRB 域结合,抑制mTOR的蛋白激酶催化活性,使之对下游效应分子p70S6K、4EBP1/eIF4E 等磷酸化的调节作用减弱或消失,阻断氨基酸等营养因子和多种生长因子转导的信号下传作用,从而抑制了翻译的开始；Rapamycin 还能通过降低CDK-cyclin 复合物激酶的活性，使细胞周期阻滞在G1期，从而发挥抗肿瘤的作用。我们采用微乳液方法制备免疫抑制剂纳米口服溶液体系为研究免疫抑制剂雷帕霉素、环孢素A纳米口服溶液配方及雷帕霉素与环孢素A组合纳米口服溶液体系的人体临床实验提供理论和实际指导依据。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用微乳液方法制备免疫抑制剂雷帕霉素、环孢素A纳米口服溶液及免疫抑制剂雷帕霉素+环孢素A组合纳米口服溶液体系的新方法，实现增加非水溶性免疫抑制剂的溶解度和渗透性并提高纳米口服溶液的稳定性，为免疫抑制剂药物的口服药物配方及组合药物配方的人体临床实验研究提供了新方法。非水溶性抗癌药物或免疫抑制剂等溶质被增溶在具有生物相容性的水包油微乳液纳米溶液体系，提高疏水性免疫抑制剂的溶解度并降低药物的副作用。

本发明的技术方案是：雷帕霉素与环孢素A纳米口服微乳液制备方法，具体包括以下步骤：

步骤1.先制备具有生物相容性的水包油纳米溶液体系:

将表面活性剂与助表面活性剂按照质量比1-3:1-2混合均匀，混合均匀后与生物相容性的油、去离子水按照质量百分比为：29-35：24-32：35-39混合，轻轻摇晃即可制备得到直径为30纳米的水包油微乳液体系；

步骤2.将一定量的克雷帕霉素或环孢素A或雷帕霉素+环孢素A固体溶解在步骤1制备得到的水包油微乳液体系中，在室温或37度温度下，以200-800转/分的转速下匀速混合2-24小时，抗癌药物组合纳米口服溶液体系。

取100微升的水包油包水乳液样品，通过色谱-质谱方法分析雷帕霉素、环孢素A的浓度，得到1毫升微乳液体系雷帕霉素、环孢素A的最大溶解度。

进一步，所述步骤2中还可以将抗癌类药物多烯紫杉醇疏水性抗癌药物与雷帕霉素与按照质量比1:2-3的比例配比，加入同时步骤1制备得到的水包油微乳液体系中，在室温或37度温度下，以200-800转/分的转速下匀速混合2-24小时，得到雷帕霉素或环孢素A或雷帕霉素+环孢素A纳米口服体系溶液。

进一步，所述生物相容性的油是食品级或医药级材料包括芝麻油、橄榄油或丙二醇单辛酸酯；

进一步，所述表面活性剂主要是食品级非离子表面活性剂包括聚氧乙烯基山梨醇月桂酸酯（包括聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60和聚山梨醇酯80）或蓖麻油聚氧乙烯醚。

进一步，所述助表面活性剂包括食品级材料聚氧乙烯和二氧二醇单乙烯醚。