[发明专利]利用玉米秸秆酶解液制备促进牡丹生长并拮抗病原菌的菌剂的方法

权利要求书

1.制备促进牡丹生长并拮抗病原菌的菌剂的方法，包括：

(1)将玉米秸秆在180-200℃和1.0-2.0Mpa条件下进行水热处理，得到经过预处理的玉米秸秆；

(2)将所述经过预处理的玉米秸秆粉碎后，用纤维素酶进行酶解，分别收集酶解液和酶解残渣；

（3）用所述酶解液、(NH₄)₂SO₄、MgSO₄、CaCO₃、玉米浆和水配制发酵培养基，每升所述发酵培养基中所述酶解液的含量满足每升所述发酵培养基的葡萄糖含量为20-50g；

(4)向所述发酵培养基中接入促进牡丹生长并拮抗病原菌的细菌进行发酵，发酵结束后收集发酵液，将所述发酵液和所述酶解残渣混合，得到促进牡丹生长并拮抗病原菌的菌剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述水热处理时间为10-20min。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述(2)为将所述经过预处理的玉米秸秆粉碎后，按以干重计每克秸秆加入10-15FPU的比例加入纤维素酶，在55-80℃、pH为4.8-5.0的条件下在水中酶解24-48h，得到玉米秸秆酶解物，将所述玉米秸秆酶解物进行离心，分别收集上清液和沉淀，所述上清液即为所述酶解液，所述沉淀即为所述酶解残渣。

4.根据权利要求1或2或3所述的方法，其特征在于：每升所述发酵培养基中，(NH₄)₂SO₄的含量为10g，MgSO4的含量为0.4g、CaCO3的含量为6g、玉米浆的含量为2g；和/或，所述发酵液和所述酶解残渣按照1:1的质量比进行混合。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述促进牡丹生长并拮抗病原菌的细菌为多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.8527。

6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述(4)在30℃培养18-30小时进行发酵。

7.由权利要求1-6中任一所述的方法制备的促进牡丹生长并拮抗病原菌的菌剂。

8.权利要求7所述的促进牡丹生长并拮抗病原菌的菌剂的用途，所述用途为下述C1）-C3）中任一种：

C1）促进牡丹生长和拮抗病原菌；

C2）所述促进牡丹生长；

C3）所述拮抗病原菌。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述促进牡丹生长体现为下述B1）-B7）中的任一种：

B1）缩短牡丹种子生根时间；

B2）提高牡丹种子生根率；

B3）缩短牡丹种子的发芽时间；

B4）提高牡丹种子的发芽率；

B5）提高牡丹的主根长度；

B6）提高牡丹苗高；

B7）提高牡丹幼苗生物量；

所述拮抗病原菌为拮抗牡丹葡萄孢菌（Botrytis paeoniae）、牡丹枝孢霉（Cladosporium paeoniae）和芍药杂色尾孢霉菌（Cercospora varricolor Winter）中的三种、任两种或任一种。

10.促进牡丹生长的方法，包括在生根前将浸种后的牡丹种子用权利要求7所述的促进牡丹生长并拮抗病原菌的菌剂处理1-3小时再进行生根培养的步骤。