[发明专利]一种检测炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及雌激素检测领域，特别涉及一种检测炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的方法。

背景技术

雌激素包括内源性雌激素和外源性雌激素，雌激素广泛存在于各种食品、饲料中，若食品中所含的雌激素过高，则可能导致儿童性早熟，成年人发生乳腺或者妇科肿瘤以及前列腺癌。

现有技术中采用的对雌激素进行检测的方法，需要将目标化合物经过均质、酶解、甲醇-水溶液提取，再经固相萃取富集净化，最后经液相-质谱联用法测定其目标化合物中是否含有一种或几种雌激素。

在实现本发明的过程中，发明人发现现有技术至少存在以下问题：

现有技术中的检测过程需要经过多个步骤对目标化合物进行处理，使得该检测过程较为繁琐，降低了检测雌激素的效率。

发明内容

为了解决现有技术中检测雌激素的效率低的问题，本发明实施例提供了一种检测炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的方法。所述技术方案如下：

本发明实施例提供了一种检测炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的方法，所述方法包括：

将样品溶于乙腈中得到浓度为50%的混合液，将所述混合液采用超声波萃取和离心萃取后过滤，得到滤液和滤渣，取所述滤渣重复进行超声波萃取和离心萃取后过滤，将得到的多次所述滤液混合均匀；对混合均匀的所述滤液进行梯度洗脱并得到炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的浓度；将所述得到的炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的浓度与对应的标准曲线比对，从而确定所述样品中的所述炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的浓度，所述标准曲线是通过炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的标准品绘制的。

具体地，采用高效液相色谱仪对混合均匀的所述滤液进行梯度洗脱。

进一步地，所述样品为食品。

具体地，所述食品为：奶粉、豆奶粉、牛奶、鸡肉或鱼肉。

具体地，所述超声波萃取的时间为20min。

具体地，所述离心的转速为4000r/min，所述离心的时间为10min。

具体地，将得到的多次所述滤液混合均匀后，于40℃用氮气吹至近干，得到残余物，将所述残余物用所述乙腈溶解并定容至1mL，经过滤膜过滤后，再经所述高效液相色谱仪进行梯度洗脱。

进一步地，所述滤膜的孔径为0.45μm。

具体地，所述高效液相色谱仪的参数为：色谱柱为Thermo C18柱；流速1mL/min；柱温30℃；检测波长224nm；进样量20μL；流动相为所述乙腈和pH值为5的0.043mol/L磷酸二氢钠缓冲液。

进一步地，所述梯度洗脱程序为：0-5min，所述流动相体积比从乙腈：磷酸二氢钠缓冲液=11:9变至乙腈：磷酸二氢钠缓冲液=17:3；5-15min，所述流动相配比从乙腈：磷酸二氢钠缓冲液=17:3变至乙腈：磷酸二氢钠缓冲液=11:9。

进一步地，所述Thermo C18柱的尺寸为：250mm×0.46mm×5μm。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本发明提供的检测炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的方法，通过乙腈将上述四种雌激素充分溶解，使得样品的前处理过程简单，对于检测的炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇损失小，且回收率高。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明实施例提供的炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇混合标准溶液色谱图。

图中：1-炔雌醇，2-己烯雌酚，3-壬基酚，4-苯甲酸雌二醇。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。

实施例1

本发明实施例提供了一种检测炔雌醇、己烯雌酚、壬基酚和苯甲酸雌二醇的方法，该方法包括：