[发明专利]寄生虫卵永久玻片标本制作方法无效
申请号: | 201410115789.5 | 申请日: | 2014-03-26 |
公开(公告)号: | CN103868774A | 公开(公告)日: | 2014-06-18 |
发明(设计)人: | 常志尚;吕锐;王秋波;张艳丽;张文卿 | 申请(专利权)人: | 青岛大学 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266071 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 寄生 虫卵 永久 标本 制作方法 | ||
技术领域
本发明属于医学寄生虫学领域,涉及一种寄生虫卵永久玻片标本制作方法,可用于制作各种寄生虫卵永久玻片标本,尤其可在人体寄生虫学教学及科研中使用。
背景技术
寄生虫卵是寄生虫病的主要诊断阶段,也是寄生虫学教学科研过程中重要的实验材料。目前,寄生虫卵玻片标本分为临时涂片标本和长期玻片标本,临时涂片标本只能一次性使用,长期玻片标本也只能保存2~3年。由于这类标本保存使用时间短,需要浪费大量的虫卵不断地制作补充,因此在寄生虫学教学科研中,尤其是一些难采集到的寄生虫卵,更需要制作成永久玻片标本供教学科研长期使用。
发明内容
本发明的目的是提供一种寄生虫卵永久玻片标本制作方法,制作的虫卵标本可长期使用及保存。
本发明提供的寄生虫卵永久玻片标本制作方法,按下列步骤进行:
a、虫卵清洗固定:将收集的虫卵放入离心管,加入两倍体积的30%~50%酒精,震荡混匀,放置6~12小时;
b、离心沉淀:将离心管放入离心机,1500~3000转/分,离心3~8分钟,弃上清,留取沉淀物;
c、冷冻干燥:把沉淀物放入真空冷冻干燥机中,12~24小时;
d、中性树胶浸润:将中性树胶和二甲苯按体积比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,搅拌混匀使之成为虫卵悬浮液,调整悬浮液中虫卵浓度为500~1500个/ml,放置1~2小时;
e、封片:搅拌混匀虫卵悬浮液,用吸管吸取一滴虫卵悬浮液滴到载玻片上,盖上盖玻片,晾干,即制成虫卵永久玻片标本。
本发明的有益效果是,创造了寄生虫卵永久玻片标本制作的新方法。通过该方法可以将有价值的虫卵制成玻片标本永久保存,避免虫卵(特别是稀有虫卵)浪费;尤其在教学科研领域,可使教学玻片标本长期重复使用,节约大量的人力、财力及物力。
具体实施方式:
实施例1
短膜壳绦虫卵永久玻片标本制作,步骤如下:
a、虫卵清洗固定:将收集的短膜壳绦虫卵放入离心管,加入两倍体积的40%酒精,震荡混匀,放置8小时;
b、离心沉淀:将离心管放入离心机,2500转/分,离心5分钟,弃上清,留取沉淀物;
c、冷冻干燥:把沉淀物放入真空冷冻干燥机中,15小时;
d、中性树胶浸润:将中性树胶和二甲苯按体积比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,搅拌混匀使之成为虫卵悬浮液,调整悬浮液中虫卵浓度为800个/ml,放置1小时;
e、封片:搅拌混匀虫卵悬浮液,用吸管吸取一滴虫卵悬浮液滴到载玻片上,盖上盖玻片,晾干,即制成短膜壳绦虫卵永久玻片标本。
实施例2
卫氏并殖吸虫卵永久玻片标本制作,步骤如下:
a、虫卵清洗固定:将收集的卫氏并殖吸虫卵放入离心管,加入两倍体积的50%酒精,震荡混匀,放置10小时;
b、离心沉淀:将离心管放入离心机,2000转/分,离心6分钟,弃上清,留取沉淀物;
c、冷冻干燥:把沉淀物放入真空冷冻干燥机中,18小时;
d、中性树胶浸润:将中性树胶和二甲苯按体积比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,搅拌混匀使之成为虫卵悬浮液,调整悬浮液中虫卵浓度为600个/ml,放置2小时;
e、封片:搅拌混匀虫卵悬浮液,用吸管吸取一滴虫卵悬浮液滴到载玻片上,盖上盖玻片,晾干,即制成卫氏并殖吸虫卵永久玻片标本。
实施例3
未受精蛔虫卵永久玻片标本制作,步骤如下:
a、虫卵清洗固定:将收集的未受精蛔虫卵放入离心管,加入两倍体积的50%酒精,震荡混匀,放置12小时;
b、离心沉淀:将离心管放入离心机,1800转/分,离心5分钟,弃上清,留取沉淀物;
c、冷冻干燥:把沉淀物放入真空冷冻干燥机中,20小时;
d、中性树胶浸润:将中性树胶和二甲苯按体积比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,搅拌混匀使之成为虫卵悬浮液,调整悬浮液中虫卵浓度为1000个/ml,放置1.5小时;
e、封片:搅拌混匀虫卵悬浮液,用吸管吸取一滴虫卵悬浮液滴到载玻片上,盖上盖玻片,晾干,即制成未受精蛔虫卵永久玻片标本。
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