[发明专利]一种高通量快速提取植物总DNA的方法及其试剂盒在审
| 申请号: | 201410115308.0 | 申请日: | 2014-03-26 |
| 公开(公告)号: | CN103882011A | 公开(公告)日: | 2014-06-25 |
| 发明(设计)人: | 王雪艳;潘潞琪;陆雯;俞晓平 | 申请(专利权)人: | 中国计量学院 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
| 地址: | 310018 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 通量 快速 提取 植物 dna 方法 及其 试剂盒 | ||
1.一种高通量快速提取植物总DNA的试剂盒,包括独立分装的缓冲液A和缓冲液B,其特征在于,所述缓冲液A为0.05~0.12M的NaOH水溶液,所述缓冲液B中含有90~100mM Tris-HCl(pH8.0)、1.8~2.5mMEDTA(pH8.0)。
2.如权利要1所述的试剂盒,其特征在于,所述缓冲液A为0.1M的NaOH水溶液。
3.如权利要1所述的试剂盒,其特征在于,所述缓冲液B中含有100mM Tris-HCl(pH8.0)、2.5mM EDTA(pH8.0)。
4.如权利要1所述的试剂盒,其特征在于,所述缓冲液B中还含有0.08~0.12%BSA和8~12%PVP中的至少一种。
5.如权利要4所述的试剂盒,其特征在于,所述缓冲液B中还含有1%BSA和8%PVP。
6.一种利用如权利要求1~5任一所述试剂盒提取植物总DNA的方法,包括:将植物组织浸入缓冲液A中,沸水浴70~120s后,加入缓冲液B,混匀离心,取上清液即获得总DNA。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述植物组织为叶片,叶片经剪碎后再与缓冲液A混合。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,叶片与缓冲液A的混合比例为0.01g:65~85μl。
9.如权利要求6所述的方法,其特征在于,沸水浴的时间为120s。
10.如权利要求6所述的方法,其特征在于,缓冲液B与缓冲液A的体积比为1:0.9~1.1。
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