[发明专利]快速检测棉花品种耐盐性的方法

说明书

技术领域

本发明涉及棉花育种技术，具体为一种快速检测棉花品种耐盐性的方法。

背景技术

目前，棉花耐盐鉴定主要有两类方法：一类为室内鉴定法，包括双层滤纸法、沙培法以及培养基培养法，将棉花种子经盐水浸泡后，经双层滤纸、沙培培养或培养基培养发芽，以发芽率鉴定品种的耐盐性；另一类为室外鉴定法，以苗期盐池胁迫下，出苗率，干物质生长量，叶片展开速度等农艺性状以级乙醛酸含量、脯氨酸含量等生理生化指标来判断品种的耐盐性能。

室内测定法一个检测周期一般为6-7天，检测结果准确性低；而室外采用苗期盐胁迫法存在的问题是，检测周期长，一般需要45天左右，试验受外界气候限制较大，只有在棉花生长季节可以检测，而且所需试验设备费用较高，需要盐池，生理生化指标测定仪器以及大量化学试剂。

发明内容

本发明为了解决现有棉花耐盐鉴定方法存在周期较长、受环境限制且成本较高的问题，提供了一种快速检测棉花品种耐盐性的方法。

本发明是采用如下技术方案实现的：快速检测棉花品种耐盐性的方法，是由如下步骤实现的：a、用蒸馏水或纯净水配置质量浓度为0.17%-0.23%的氯化钠溶液后，进行灭菌；b、选取一定量饱满种子，用浓硫酸对棉花种子进行脱绒；c、用稀硫酸浸种催芽后，用纯净水冲洗干净；用质量浓度为14%-16%的双氧水浸种消毒后，用无菌水冲洗干；d、将催芽消毒处理后的种子，放入步骤a制得的氯化钠溶液中培养；e、以种子生长点裂开，下胚轴露出开口为吐芽，得出种子的处理吐芽率；f、计算公式为：耐盐指数=（对照吐芽率-处理吐芽率）/对照吐芽率，得出种子的耐盐指数。

氯化钠溶液质量浓度的选取和双氧水质量浓度的选取是经过大量反复试验得出的，氯化钠溶液质量浓度过高，对棉种吐芽抑制压力过大，造成棉花品种间吐芽差异不显著，不能反映棉花品种的耐盐性差异；浓度过小，对棉种吐芽的抑制压力过小，也会造成品种间吐芽差异不显著，不能反映棉花品种耐盐性差异，另外浓度过小还会造成盐处理与对照之间吐芽差异不显著。

双氧水的质量浓度过高，会对棉种吐芽产生抑制；浓度过小，会造成灭菌效果不好。

本发明所采用的耐盐方法使得棉花品种吐芽一直处于盐胁迫处理中，比盐水浸泡后沙培或滤纸培养的检测结果更精确，对于棉花耐盐碱育种有很好的辅助作用，而且仅需24小时就能快速鉴定棉花品种的耐盐性，全程在实验室操作，不受外界气温影响，具有工艺简单、成本低的优点。

具体实施方式

快速检测棉花品种耐盐性的方法，是由如下步骤实现的：a、用蒸馏水或纯净水配置质量浓度为0.17%-0.23%的氯化钠溶液后，进行灭菌；b、选取一定量饱满种子，用浓硫酸对棉花种子进行脱绒；c、用稀硫酸浸种催芽后，用纯净水冲洗干净；用质量浓度为14%-16%的双氧水浸种消毒后，用无菌水冲洗干；d、将催芽消毒处理后的种子，放入步骤a制得的氯化钠溶液中培养；e、以种子生长点裂开，下胚轴露出开口为吐芽，得出种子的处理吐芽率；f、计算公式为：耐盐指数=（对照吐芽率-处理吐芽率）/对照吐芽率，得出种子的耐盐指数。

具体实施过程中，采用高压灭菌锅在121℃灭菌15分钟即可；稀硫酸的质量浓度为45%，浸种为15分钟，双氧水浸种的时间为2.5-3.5小时；培养架的温度控制在27±2℃，10/14小时光/暗培养22-24小时。