[发明专利]还原敏感性聚乙烯亚胺衍生物，其制备方法及应用

权利要求书

1.一种还原敏感性聚乙烯亚胺衍生物，其特征在于，其化学组成式为：(R₁-PEI)_x-SS-(PEI-R₂)_y，化学组成式中两个PEI均为直线型PEI，-SS-为二硫键；

其结构式为：

组成式和结构式中，x和y表示重复单元的个数，且x＝1-120，y＝1-120；R₁、R₂基团各自独立选择为通式为H-(CH₂)n-的基团，n选自0-14中的任意整数，且R₁和R₂中的n值不同时为0；其中直线型聚乙烯亚胺的重均分子量为200-5000g/mol。

2.根据权利要求1所述的还原敏感性聚乙烯亚胺衍生物，其特征在于，R₁、R₂基团各自独立选择为氢原子、甲基、乙烷基、丙烷基、丁烷基、戊烷基、己烷基、庚烷基、辛烷基、壬烷基、癸烷基、十一烷基、十二烷基、十三烷基或十四烷基。

3.权利要求1或2所述的还原敏感性聚乙烯亚胺衍生物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将聚乙烯亚胺溶于二氯甲烷和甲醇的混合溶剂中，在30-40℃下搅拌溶解，得到聚乙烯亚胺溶液；

(2)将卤代烃溶于二氯甲烷和甲醇的混合溶剂中，以一定速度滴加至聚乙烯亚胺溶液中，在30-40℃下，避光反应12-48h；

(3)将所得混合溶液旋干溶剂得到半固体膏状物，将该半固体膏状物混悬于5-10ml蒸馏水中，然后用一定截留分子量的透析袋进行透析，冷冻干燥后制得烷基化疏水修饰的聚乙烯亚胺；

(4)称取一定量冷冻干燥的聚乙烯亚胺或烷基化疏水修饰的聚乙烯亚胺，溶解于一定体积的甲醇溶液中，加入一定量的硫化丙烯，在氮气保护条件下60℃，避光反应24-48h；

(5)将所得混合溶液旋干溶剂得到半固体膏状物，加入一定体积DMSO溶解该膏状物后，室温避光反应48-72h，然后用一定截留分子量的透析袋透析该反应液，透析介质为去离子水，将透析液体冷冻干澡后，即得到还原敏感性聚乙烯亚胺衍生物；

当制备的还原敏感性聚乙烯亚胺衍生物中的R₁或R₂均选择为氢原子时，则省略烷基化修饰步骤1-3。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，二氯甲烷和甲醇混合溶剂的体积比为90:10-99:1；脂肪烃基与聚乙烯亚胺的摩尔比为0:1-12:1。

5.根据权利要求3或4中任一项的制备方法，其特征在于，当与卤代烃反应的聚乙烯亚胺为直线型聚乙烯亚胺时，需在反应体系中添加一定量三乙胺；用于第(4)步反应的聚乙烯亚胺的pH值需调节为7.2-7.4。

6.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，硫化丙烯与聚乙烯亚胺反应的摩尔比为2:1-15:1。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，硫化丙烯与聚乙烯亚胺反应的摩尔比为2:1-15:1。

8.根据权利要求1-2任一项所述的还原敏感性聚乙烯亚胺衍生物在制备体内或体外核酸递送载体中的应用。

9.根据权利要求8的应用，其特征在于，制备体内或体外核酸递送载体时，递送的质粒DNA的大小为1-30Kb。

10.根据权利要求8的应用，其特征在于，制备体内或体外核酸递送载体时，递送的siRNA的大小为15-30bp。

11.根据权利要求8的应用，其特征在于，制备体内或体外核酸递送载体时，还原敏感性聚乙烯亚胺衍生物与核酸的质量比为1-30:1。