[发明专利]番茄耐盐度的快速评价方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种番茄耐盐度的快速评价方法，可用于番茄的耐盐育种、耐盐品种的种植推广，属于农作物育种技术领域。

背景技术

组织培养技术是作物育种中常用的成熟技术，通过切取叶、茎、根等植物部分进行无菌培养来获得整株的植物。水培技术是利用植物的再生能力，选取叶片、枝条，浸没在无菌水中进行生根，通过注入营养液促进植物的生长。

盐渍化的土壤在世界上分布很广，面积占世界陆地总面积的三分之一（翟凤林，曹鸣庆.植物的耐盐性及其改良.北京:农业出版社,1989,3-4）。盐分是限制植物生长和产量的主要环境因素之一（Genin S，Boucher C.2002）。培育和种植耐盐植物是人类克服土壤盐渍化和淡水缺少的重要途径之一。番茄(Lycopersicon esculentum Mill)，属于茄科番茄属，是一种中度盐敏感型鲜食和加工型蔬菜作物，营养价值很高，是许多国家的重要蔬菜作物。近年来，番茄的栽培面积在全球不断扩大，许多国家都开展了耐盐番茄的研究，充分利用围海造田的新增耕地扩大番茄种植面积或者用来克服设施栽培条件下产生的土壤盐渍化。其中，潘那利番茄(Solanum pennellii LA716)是最耐盐的番茄野生种之一（Jones R A.High salt tolerance potential in Lyeopersion species during germinateon.Euphytica,1986,35:575—582），长期被作为耐盐材料进行研究。

番茄是一种严格的自花授粉植物，在育种继代纯化方面比较容易操作，近年来通过品种杂交、耐盐基因导入、高盐环境下自然筛选等方法选育的品种多有报道。我们实验室也已经育成三个耐盐品种。但现有技术中，对番茄耐盐评价的方法主要通过对番茄耐盐指标，例如对在盐害指数和叶绿素含量、质膜透性等生理指标（李烨,姜景彬,等.番茄苗期耐盐性相关指标的筛选研究.北方园艺，2009（10）:84—86）进行研究，但这些指标很难应用于实际生产中。

发明内容

本发明针对目前对番茄耐盐程度无有效鉴定方法，在推广中缺少依据的现状，开发一种番茄耐盐度的快速评价方法，使育种人员、研究人员和生产者能直观地了解不同品种的耐盐程度，从而做出品种选择。

本发明以耐盐性极强的潘那利番茄(Solanum pennellii LA716)作为参照；基于Mocledon人工海水进行优化配比，去除含量低于0.5g/L的化合物，并设置人工海水浓度梯度；采用两种不同的植物生根方式进行实验。本发明通过以下技术方案实现，具体步骤如下：

（1）潘那利番茄和待评价番茄材料的种植；

（2）潘那利番茄和待评价番茄材料的组织培养或水培；

（3）潘那利番茄和待评价番茄材料的耐盐梯度实验；

（4）待评价番茄材料的耐盐情况与潘那利番茄的比较和评价；其中：

步骤（3）中，潘那利番茄和待评价番茄材料的耐盐梯度实验的具体方法为：将CaCl₂1.153g、MgCl₂2.26g、MgSO₄3.248g、KCl0.721g、NaCl26.726g溶解于蒸馏水中，并定容到1升，配制成全浓度人工海水，再用蒸馏水稀释，分成5-10个不同梯度把潘那利番茄和待评价番茄材料的生长到两叶一心的植株放在各个梯度人工海水中培养。

步骤（1）中，所述潘那利番茄和待评价番茄材料的种植采取的具体方法为：把潘那利番茄和待评价番茄材料的种子播种在穴盘的基质中，获取长势良好的植物苗。

步骤（2）中，所述潘那利番茄和待评价番茄材料的组织培养采取的具体方法为：剪取生长量相同的带有二叶一心的潘那利番茄和待评价番茄材料的带叶片的侧枝，消毒后，在无菌操作条件下，移植到灭菌的1/2MS培养基上进行生根培养。

步骤（2）中，所述潘那利番茄和待评价番茄材料的水培采取的具体方法为：剪取生长量相同的带有二叶一心的潘那利番茄和待评价番茄材料的的侧枝，伤口消毒后，放置在无菌水中进行生根培养。

步骤（4）中，所述待评价番茄材料的耐盐情况与潘那利番茄的比较和评价采取的具体方法为：根据潘那利番茄和待评价番茄材料在不同梯度人工海水中的生长和死亡情况，对每一组实验材料进行比较和评价，确定待评价番茄材料的耐盐度。