[发明专利]苦参素抑制丙型肝炎病毒感染靶细胞的应用

说明书

技术领域

本发明属于丙型肝炎病毒防治技术领域，涉及苦参素抑制丙型肝炎病毒感染靶细胞的应用。

背景技术

丙型肝炎是肝脂肪变、慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌发生的主要原因之一，据统计全球约有1.7亿丙肝患者。我国丙型肝炎患病率高，但目前临床治疗方法有限，国际标准化疗法为干扰素+利巴韦林，仅对50%的1型患者有效，临床中仍有部分患者因不耐受干扰素副作用而无法进行治疗，因此急需其它替代疗法。

由于丙型肝炎病毒HCV体外培养系统不完善，目前动物培养系统仅限于黑猩猩；细胞培养系统尚不成熟，加之HCV在被感染者组织和血清中浓度较低，病毒变异高，尤其是E2氨基末端由27个氨基酸残基组成的高变区l(hypervirable region l，HVRl)，含有重要的中和性抗原表位，能诱导宿主产生中和性抗体，导致对HCV培养系统研究仍不成熟。

苦参素(OM)是从中药苦豆子和苦参根中提取的有效成分,是苦参的主要药效成分，其处方适应症为慢性乙型病毒性肝炎，能有效降低乙肝病毒DNA水平，并能改善肝纤维化的多种血清指标，同时能调节免疫，诱生内源性干扰素。

发明内容

本发明解决的问题在于提供苦参素抑制丙型肝炎病毒感染靶细胞的应用，提供新的抗丙型肝炎病毒的药物。

本发明是通过以下技术方案来实现：

苦参素在制备防治丙型肝炎病毒感染靶细胞的药物中的应用。

所述的药物为抑制丙型肝炎病毒复制的药物。

所述的药物为防治2a型丙型肝炎病毒感染靶细胞的药物。

苦参素在制备抑制丙型肝炎病毒RNA复制的药物中的应用。

所述的药物为抑制2a型丙型肝炎病毒RNA复制的药物。

所述的药物中苦参素的含量不低于4mg/ml。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明提供了苦参素抑制丙型肝炎病毒感染靶细胞的应用，在构建HCVcc系统的基础上，通过MTT、RT-PCR及免疫荧光等验证苦参素体外抗病毒功效，结果表明苦参素能够抑制丙型肝炎病毒的复制，可用于抗丙型肝炎病毒制剂的制备，表明了苦参素抗丙肝作用可用于临床中部分丙肝患者。

临床中丙肝国际化疗法为干扰素联合利巴韦林抗病毒治疗，但仅对50%1型感染者有效，合并自身免疫性疾病或甲状腺疾病、精神异常等患者更无法使用该疗法，导致其进展为肝硬化危险性比普通慢性丙肝患者显著升高，苦参素可用于肝硬化失代偿期患者，且其具有升高白细胞等优势，本发明提供苦参素的抗丙肝病毒及其制药的应用，因此可用于丙肝抗病毒治疗。

附图说明

图1为HCVcc电穿孔72h后转染效率(10×)：细胞核被染成蓝色。A:H77/pEGFP-HCV转染Huh7.5.1细胞；B:J6/pEGFP-HCV转染Huh7.5.1细胞；C:SGR/pEGFP-HCV转染Huh7.5.1细胞；D:阴性对照：未转染任何载体；

图2苦参素作用及Huh7.5.1细胞活性的MTT检测结果：J6cc感染细胞后不同浓度苦参素处理靶细胞，每一数据均采用均数±标准差表示；^※P>0.05和^＃P<0.05分别与对照组相比).Blank:未处理，con：仅用J6_cc处理；

图3为8mg/ml苦参素处理J6_cc感染Huh7.5.1细胞的mRNA检测结果；J6:J6+苦参素处理细胞，Con:J6处理细胞.(^※P<0.05分别与对照组相比)；

图4为HCVcc感染Huh7.5.1细胞，其中A：H77cc感染Huh7.5.1细胞；B：J6cc感染Huh7.5.1细胞；C：SGRcc感染Huh7.5.1细胞；D:阴性对照：HCV未感染细胞。

图5为J6cc10倍浓度梯度稀释Huh7.5.1细胞,HCVcc滴度分别从10¹至10⁶/mL：A:100ul HCVcc处理Huh7.5.1细胞;B:11ul HCVcc+99ul DMEM处理Huh7.5.1细胞;C:10ul前混合物+100ul DMEM处理Huh7.5.1细胞;D-E:同前。