[发明专利]对植物具有多种功能的海洋芽孢杆菌及应用

权利要求书

1.对植物具有多种功能的海洋芽孢杆菌，从海洋生境获得海洋芽孢杆菌BY-1188菌株(Bacillus marinus)，经人工诱变育种和培养条件优化，其适宜的人工培养发酵的条件为：

1)以其保藏编号为：CGMCC No.6187的BY-1188菌株；

2)菌株在上述固体培养基置22℃-27℃温箱培养2-3天，将固体培养基生长好的菌体刮下，接入步骤1中的培养液培养3天为种子液，再将种子液接入40-50L上述培养液中，22℃-27℃，转速150rpm，振荡培养3-5天，获得发酵液，并可逐级放大。

2.根据权利要求1所述的对植物具有多种功能的海洋芽孢杆菌的应用，其特征在于：海洋芽孢杆菌BY-1188菌株采用对峙培养法、96孔板法、抑菌率统计法3种抑菌测试联合测试方法选出，菌株实用性强：

1)对峙培养法、抑菌率统计法为常规方法，对农业常见和危害严重的9种植物病原真菌：稻瘟霉菌Pyricularia oryzae、茄链孢菌Alternaria salani、镰孢霉菌Fusarium oxysporrum、灰葡萄孢菌Botrytis cinerea、大丽轮枝菌Verticillium dahliae、芽枝霉菌Cladosporium fulvum、辣椒疫霉菌Phytophthora capsici、丝核菌Rhizoctonia solani赤霉菌Fusarium graminearum进行抑菌测试，对峙培养法中抑菌圈30-35mm，抑菌率统计法中抑菌率73.33-87.60％；

2)96孔板为常规测试基础上创制的改良方法，以发酵液直接测，测试单位为μL/mL，供试靶标病原菌为：稻瘟霉菌Pyricularia oryzae和茄链孢菌Alternaria salani，供试靶标病原菌孢子悬浮液以每孔50μL的量加入到96孔板的第1行各孔(A孔)中，之后将海洋芽孢杆菌BY-1188菌株的无细胞滤液50μL，加入各孔混匀，并依次倍半稀释到第8行最后1孔(H孔)，以加无菌水的孔做为对照，27℃静置培养3小时后观察，观测标准为：对照的病原菌孢子90％为正常萌发，处理的病原菌孢子死亡或畸形率在90％为抑制，每个处理重复3次，处理抑菌浓度越小，表示活性越高，BY-1188的抑菌活性MIC为2，显示强抑菌活性。

3.根据权利要求1所述的对植物具有多种功能的海洋芽孢杆菌的应用，其特征在于：海洋芽孢杆菌BY-1188菌株在植物活体上对辣椒疫霉病、番茄灰霉病防治效果分别为88.4％和85.1％，防治效果超过传统化学农药防治水平。

4.根据权利要求1所述的对植物具有多种功能的海洋芽孢杆菌的应用，其特征在于：海洋芽孢杆菌BY-1188菌株在普通耕作土及海滨盐渍土栽种的黄瓜、番茄、辣椒、甘蓝、甜瓜、茄子均能正常定殖，浸根栽种5天后根、茎、叶的定殖数分别可达5.98×10³、6.24×10³、3.78×10³，定殖数可维持15-20天。

5.根据权利要求1所述的对植物具有多种功能的海洋芽孢杆菌的应用，其特征在于：海洋芽孢杆菌BY-1188菌株对植物种子的萌发和幼苗的生长都具有促进作用，菌液处理的番茄植株苗健壮，叶片大，叶色浓绿，茎秆粗，根毛长，幼苗的株高、根长、茎粗分别增加65.0％-84.4％；叶绿素a、b、总叶绿素分别提高60.0％，-143.9％，植株鲜重、干重增加86.0％-115.8％。

6.根据权利要求1所述的对植物具有多种功能的海洋芽孢杆菌的应用，其特征在于：海洋芽孢杆菌BY-1188菌株在盐渍土壤诱导植物抗盐，菌株降低了根、叶Na⁺的积聚39.5％，提高根、叶K⁺含量36.09％，植株含水量提高73.66％，植株盐害症状减轻，盐害指数降低了56.67％。