[发明专利]一种核酸扩增反应试剂的冻干保护剂及冻干方法

权利要求书

1.一种用于冻干保护的组合物，为如下1）或2）：

1）所述组合物由海藻糖、甘露醇、牛血清白蛋白和水组成，所述海藻糖、甘露醇、牛血清白蛋白和所述水的配比为4.0—25g:1—7g:1.0—7g：49-50ml；

2）所述组合物由海藻糖、甘露醇、牛血清白蛋白、吐温、Tris-HCl和水组成，所述海藻糖、所述甘露醇、所述牛血清白蛋白、所述吐温、所述Tris-HCl和所述水的配比为4.0—25g:1—7g:1.0—7g：0.1—0.25ml：2.5×10^-3—5.0×10^-3mol：49-50ml。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：

1）所述的组合物中，所述海藻糖、甘露醇、牛血清白蛋白和水的配比为5.26—25g:1.32—6.25g:1.32—6.25g:49-50ml；

2）所述的组合物中，所述海藻糖、所述甘露醇、所述牛血清白蛋白、所述吐温、所述Tris-HCl和所述水的配比为4.0—25g:1.32—6.25g:1.32—6.25g：0.1—0.25ml：2.5×10^-3—5.0×10^-3mol：49-50ml。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于：

所述甘露糖和所述牛血清白蛋白为等质量比。

4.一种制备权利要求1-3中任一所述组合物的方法，包括如下步骤：将权利要求1-3中任一所述组合物的各物质按照对应的质量比混匀，即得到用于冻干保护的组合物。

5.权利要求1-3中任一所述用于冻干保护的组合物在冻干核酸扩增反应试剂中的应用。

6.一种冻干核酸扩增反应试剂的方法，包括如下步骤：

1）将权利要求1-3中任一所述用于冻干保护的组合物和核酸扩增反应试剂混匀，干燥，得到干燥产物；

2）将所述干燥产物冻干，即得到核酸扩增反应试剂冻干制品。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

步骤1）中，所述组合物和所述核酸扩增反应试剂的体积比为2.81-10.33:8.75-22.1；

所述核酸扩增反应试剂为环介导等温扩增反应试剂、反转录环介导等温扩增反应试剂、滚环扩增反应试剂、依赖于核酸序列恒温扩增反应试剂、聚合酶链式反应试剂、反转录PCR反应试剂或实时荧光定量PCR反应试剂。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于：

步骤1）中，所述干燥采用冷冻真空干燥；

步骤2）中，所述冻干的条件为：预冻阶段经过40min—1h，隔板温度下降到-42℃—-40℃、预冻时低温保持时间为3h—4h；主干燥阶段，首先用10min—30min抽真空至0.1mbar、再用2h—4h将搁板温度升至-25℃—-15℃，然后保持4h—6h，此阶段共6h10min—10h30min；终末干燥阶段，首先用10min—30min抽真空至0.01mbar，再用2h—3h将搁板温度升至15℃—25℃,然后保持3h—5h，此阶段共5h10min—8h30min。

9.根据权利要求6-8中任一所述的方法，其特征在于：

若所述核酸扩增反应试剂中含有吐温和Tris-HCl，则所述组合物为1）所述组合物；

若所述核酸扩增反应试剂中不含有吐温和Tris-HCl，则所述组合物为2）所述组合物。