[发明专利]一种生物化学拆分8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷的方法

权利要求书

1.一种生物化学拆分8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷的方法，其特征在于该方法以外消旋顺式-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷（Ⅰ）和酰基供体（Ⅱ）为底物，在酶的催化作用下，与反应溶剂在30～50℃进行反应7～48h，制得混合物（1R，6S）-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷（Ⅲ）和（1S，6R）-2-酰基-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷（Ⅳ）；然后在加热回流条件下酸催化（1S，6R）-2-酰基-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷水解得到（1S，6R）-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷（Ⅴ），化学反应式如下：

2.如权利要求1所述的一种生物化学拆分8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷的方法，其特征在于该方法具体包括以下步骤：

步骤(1).将外消旋顺式-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷、酰基供体溶于反应溶剂中并加入酶，置于30～50℃摇床中震荡反应7～48h；反应结束后，过滤，滤渣用洗涤溶剂进行洗涤，得到滤液，然后滤液再用无机酸进行酸洗，得到有机层与水层；其中每1mL反应溶剂加入外消旋顺式-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷0.1～0.5mmol，酶25mg～100mg；外消旋顺式-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷与酰基供体的摩尔比为1:0.5～1:10；

所述的洗涤溶剂与反应溶剂相同；

步骤(2).将步骤(1)有机层干燥，加热减压旋干；然后加入酸在105～110℃下加热回流催化水解5～8h，反应结束后加去离子水稀释至原体积的2～5倍，然后进行有机溶剂洗，得到水层溶液；在水层溶液中加入弱碱氨水或碳酸钠水溶液调节PH值至7～10，接着加入有机溶剂进行萃取，取有机层溶液，洗涤后干燥，加热减压浓缩，得到光学纯的（1S，6R）-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷；有机层中（1S，6R）-2-酰基-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷与酸的摩尔体积比为1：2～5，单位为mmol/mL；

所述的有机溶剂为二氯甲烷、正己烷、甲苯、异丙醚或甲基叔丁基醚。

3.如权利要求2所述的一种生物化学拆分8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷的方法，其特征在于该方法具体包括以下步骤：

步骤(1).将外消旋顺式-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷、酰基供体溶于反应溶剂中并加入酶，置于30～50℃摇床中震荡反应7～48h；反应结束后，过滤，滤渣用洗涤溶剂进行洗涤，得到滤液，然后滤液再用2N盐酸洗涤，得到有机层与水层；其中每1mL反应溶剂加入外消旋顺式-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷0.1～0.5mmol，酶25mg～100mg；外消旋顺式-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷与酰基供体的摩尔比为1:2.5；所述的洗涤溶剂与反应溶剂相同；

步骤(2).步骤(1)有机层干燥，加热减压旋干；然后加入浓盐酸在105～110℃加热下回流催化水解5～8h，反应结束后加水稀释至原体积的2～5倍，用二氯甲烷洗涤，得到水层溶液；水层溶液中加氨水调节PH值至8～9，加入二氯甲烷萃取，取有机层溶液进行饱和食盐水洗，接着硫酸钠干燥后，加热减压浓缩，得到光学纯的（1S，6R）-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷；有机层中（1S，6R）-2-酰基-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷与酸的摩尔体积比为1：2～5，单位为mmol/mL。

4.如权利要求1、2、3所述的一种生物化学拆分8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷的方法，其特征在于所述的酶为南极假丝酵母脂肪酶A或南极假丝酵母脂肪酶B。

5.如权利要求1、2、3所述的一种生物化学拆分8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷的方法，其特征在于所述的反应溶剂为二氯甲烷、正己烷、甲苯、异丙醚或甲基叔丁基醚。