[发明专利]一种软骨组织工程修复支架及其制备方法

权利要求书

1.一种软骨组织工程修复支架，其特征在于，所述软骨组织工程修复支架的成分包括天然高分子水凝胶和脱钙骨基质，所述脱钙骨基质表面偶联有骨髓间充质干细胞亲和肽。

2.根据权利要求1所述的软骨组织工程修复支架，其特征在于，所述骨髓间充质干细胞亲和肽的纯度大于等于95%。

3.根据权利要求1所述的软骨组织工程修复支架，其特征在于，所述天然高分子水凝胶为壳聚糖水凝胶。

4.一种权利要求1-3任一项所述的软骨组织工程修复支架的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

制备脱钙骨基质；

将骨髓间充质干细胞亲和肽偶联到所述脱钙骨基质表面，得到骨髓间充质干细胞亲和肽修饰的脱钙骨基质；

配制天然高分子水凝胶溶液；

将所述天然高分子水凝胶溶液注射至所述骨髓间充质干细胞亲和肽修饰的脱钙骨基质中，使所述天然高分子水凝胶溶液完全渗入所述骨髓间充质干细胞亲和肽修饰的脱钙骨基质中，并在预设温度下进行凝胶化反应，得到所述软骨组织工程修复支架。

5.根据权利要求4所述的软骨组织工程修复支架的制备方法，其特征在于，所述天然高分子水凝胶溶液在20℃时的粘度为100-400cP。

6.根据权利要求4所述的软骨组织工程修复支架的制备方法，其特征在于，所述预设温度为34-38℃。

7.根据权利要求4所述的软骨组织工程修复支架的制备方法，其特征在于，所述制备脱钙骨基质具体为：

将股骨上附着的软组织剔去，得到修整的股骨；

取所述修整的股骨的骨骺并清洗；

将所述骨骺切割成预定大小的骨块，对所述骨块进行脱脂处理；

利用EDTA脱钙技术对脱脂后的骨块进行脱钙，待所述骨块完全脱钙后，对所述骨块进行修剪、消毒，得到所述脱钙骨基质，并于4℃保存。

8.根据权利要求4所述的软骨组织工程修复支架的制备方法，其特征在于，所述将骨髓间充质干细胞亲和肽偶联到所述脱钙骨基质表面具体为：

配制浓度为10%的己二胺的异丙醇溶液，将所述脱钙骨基质浸泡在所述己二胺的异丙醇溶液内1小时，进行胺化处理后冲洗，得到胺化处理的脱钙骨基质；

将所述胺化处理的脱钙骨基质浸泡在含双异官能团交联剂的有机溶液中，并用磷酸盐缓冲液进行冲洗，得到双异官能团交联剂功能化的脱钙骨基质；

将含有骨髓间充质干细胞亲和肽的磷酸盐缓冲液注入所述双异官能团交联剂功能化的脱钙骨基质中，室温孵育，将骨髓间充质干细胞亲和肽偶联到所述脱钙骨基质表面。

9.根据权利要求4所述的软骨组织工程修复支架的制备方法，其特征在于，所述配制天然高分子水凝胶溶液具体为：

配制浓度为2.5%g/ml的壳聚糖的乙酸溶液，高压灭菌后于4℃保存；

配制浓度为60%的甘油磷酸钠溶液，除菌后于4℃保存；

在冰浴环境中，将所述甘油磷酸钠溶液滴加到所述壳聚糖的乙酸溶液中，搅拌至澄清，得到所述天然高分子水凝胶溶液，室温保存；

所述甘油磷酸钠溶液与所述壳聚糖的乙酸溶液的质量比为1：9。

10.根据权利要求9所述的软骨组织工程修复支架的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖的脱乙酰度大于等于95%。