[发明专利]一种茶蛋白高F值低聚肽及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及功能肽研究领域，尤其涉及一种茶蛋白高F值低聚肽及其制备方法和应用。 

背景技术

高F值低聚肽是蛋白酶作用于食物蛋白后形成的一种低分子量生理活性肽，因其具有独特的氨基酸组成和生理功能而受到食品和医药界的高度关注。Fischer值（F值），是支链氨基酸（Branched chain amino acid,BCAA；主要指亮氨酸、异亮氨酸和撷氨酸）与芳香族氨基酸（Aromatic amino acids,AAA；主要指苯丙氨酸、酪氨酸）的摩尔比值，高F值的F值应大于20。高F值低聚肽中BCAA含量高、AAA含量低，氨基酸组成独特，易被人体消化吸收。 

近年研究发现，高F值低聚肽具有减轻或消除肝性脑病症状及抗疲劳作用，补充高付出病人的膳食营养，改善蛋白质营养状况，可作为高强度工作者及运动员的食品营养强化剂；此外，还具有解酒护肝、抑制癌细胞增值、降低血清胆固醇浓度等多种生理调节功能。 

我国茶资源丰富，然而对于茶资源的综合利用还远远不够，尤其是一些品质较差的茶叶和茶叶深加工副产物。应用一系列创新技术将它们开发成品质优良的深加工产品，不仅可以满足我国居民膳食结构调整的需求，而且对调整农业结构，增加茶农收入，改善农村生态环境将起到很好的促进作用。 

茶叶中含有约20-30%（干重）的蛋白质，主要包括谷蛋白（82.05%）和醇溶蛋白（13.61%），还含有少量的白蛋白（3.47%）和球蛋白（0.87%）；就氨基酸组成而言，茶叶蛋白中支链氨基酸和中性氨基酸含量均相当高，是植物蛋白中颇少见的特色组成。在茶叶产量大幅提高的同时，如果能对其中占大部分的茶叶蛋白进行深度利用，必将会给整个茶叶产业带来巨大的利润和发展空间。目前国内外的研究都是针对茶叶蛋白的提取、纯化及 改性等方面，而对茶蛋白进一步深度加工的研究在我国基本是空白的，尤其是以其为原料制备高F值低聚肽在国内外都鲜见报到。 

发明内容

本发明提供了一种茶蛋白高F值低聚肽的制备方法，用于制备茶蛋白来源的高F值低聚肽产品，解决目前高F值低聚肽产品中植物蛋白来源少的问题。 

一种茶蛋白高F值低聚肽的制备方法，包括： 

（1）将茶蛋白加入水中，混匀，然后加入蛋白酶A进行第一步水解，得到第一步水解液； 

（2）向第一步水解液中加入蛋白酶B进行第二步水解，得到第二步水解液； 

（3）将第二步水解液进行脱盐，得到脱盐液；脱盐液经活性炭吸附、超滤、浓缩，得到茶蛋白高F值低聚肽； 

其中，所述的蛋白酶A为碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和复合风味蛋白酶中的至少一种； 

所述的蛋白酶B为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和复合风味蛋白酶中的至少一种。 

第一步水解主要是为了将大分子茶蛋白尽可能多得水解成多肽，并使大部分被切下肽链的N-末端或C-末端为芳香族氨基酸；第二步水解的主要目的是将内切蛋白酶水解所暴露出的疏水性氨基酸（特别是芳香族氨基酸）从多肽末端切除；活性炭吸附能将游离出来的芳香族氨基酸有效去除，从而得到F值较高的肽产品。 

步骤（1）中，所述的茶蛋白可以为茶叶或茶渣中提取得到的茶蛋白粉，也可以为茶蛋白粉经预处理后得到的改性茶蛋白。 

所述的预处理可以为热处理、亚硫酸钠处理或挤压组织化改性处理。通过预处理，能有效打开茶蛋白紧密的分子结构，便于后续水解。 

所述的茶蛋白用量可以为水重量的1-10%，优选为4%。 

所述的蛋白酶A优选为碱性蛋白酶或中性蛋白酶；更优选为碱性蛋白酶。碱性蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶，是一种非特异性内切蛋白酶。碱性蛋白酶的作用位点主要在羧基侧具有芳香族或疏水性氨基酸的肽键，能从肽 链内部将肽链断开，较好地分解蛋白或肽，使蛋白内部的疏水性氨基酸暴露出来，形成含有疏水性氨基酸的肽。同时，由于茶蛋白在碱性条件下溶解性较好，采用碱性蛋白酶更有利于酶与蛋白的接触，便于水解的进行。 

以每千克茶蛋白计，所述的碱性蛋白酶的用量可以为10-50g，优选为40g。该条件下碱性蛋白酶对茶蛋白的水解度能达到20%以上，水解效果较好。 

所述的第一步水解的反应体系pH可以为7-10，优选为9。pH值过高或过低均对酶活不利；且在偏碱性条件下茶蛋白溶解性更好，更利于酶的作用。 

所述的第一步水解的反应温度可以为40-60℃，优选为50℃。反应温度会影响单位时间内酶与底物分子间的有效接触次数，温度过低，酶活受到抑制；温度过高，酶蛋白易失活变性。