[发明专利]一种二氢噁唑类抗生素及其制备方法

权利要求书

1.一种二氢噁唑类抗生素，其特征在于：其化学分子式为C₁₀H₁₁NO₃，其化学结构式如下式(I)所示： 

2.一种生物合成如权利要求1所述的二氢噁唑类抗生素的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤： 

步骤一：发酵 

(1)发酵菌种：发酵菌株是在中国山东半岛农药污染地区采集土样，在实验室分离培养获得，鉴定为雅加达链霉菌(Sereptomyces djakartensis)；该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期为2012年11月13日，保藏登记号为CGMCC No.6817； 

(2)斜面培养：采用淀粉酪素培养基于1×10⁵帕下灭菌30min，接菌后28-32℃培养4-5d；所述淀粉酪素培养基由如下组分组成：可溶性淀粉10.0g，磷酸氢二钾2.0g，硝酸钾2.0g，氯化钠2.0g，酪蛋白0.3g，7水硫酸镁0.05g，碳酸钙0.02g，7水硫酸亚铁0.01g，琼脂20.0g，蒸馏水1000ml，PH值7.2-7.4； 

(3)种子培养：将种子培养基分装于250ml三角瓶，每瓶20-100ml，于1×10⁵帕下灭菌30min；用无菌水将斜面上的孢子洗下制成孢子悬浮液，使其浓度为1×10⁶-×10⁷个/ml；每瓶加0.5-2.0ml孢子悬浮液，置于转速为150-180r/min的摇床上，28-32℃培养24-36h；所述种子培养基由如下组分组成：小米10-30g加蒸馏水1000ml煮沸15min后滤去米粒，加入葡萄糖15-30g，氯化钠2-5g，蛋白胨2-10g，碳酸钙0.2-0.8g，硫酸铵0.5-2.5g，PH值7.2-7.4； 

(4)液体发酵：将发酵培养基分装于250ml三角瓶，每瓶20-100ml，于1×10⁵帕下灭菌30min；接种步骤(3)的种子培养物，接种量10％(V/V)，置于转速为150-240r/min的摇床上，28-32℃培养4-6d；所述发酵培养基为小米10-30g加蒸馏水1000ml煮沸15min后滤去米粒，加入葡萄糖15-30g,氯化钠2-5g,蛋白胨2-10g,碳酸钙0.5-2.5g， 硫酸铵1-3g，PH值7.2-7.4； 

步骤二：抗生素的分离 

(1)将步骤一制得的发酵液经100-200目筛网过滤后，用HPD大孔吸附树脂吸附，甲醇-水梯度洗脱； 

(2)将甲醇洗脱液浓缩后进行硅胶柱层析，以乙酸乙酯/甲醇(v/v)9∶1、8∶2、7∶3、6∶4和纯甲醇依次洗脱，收集以乙酸乙酯/甲醇(v/v)9∶1的流分，浓缩后放置过夜，析出抗生素粗结晶； 

(3)将上述粗结晶用制备高效液相色谱纯化，得到式(I)所示的抗生素纯品。 

3.一种化学合成如权利要求1所述的二氢噁唑类抗生素的方法，其特征在于：所述方法的化学反应式如下： 

先将邻羟基苯甲氰与甲醇在乙酰氯存在的情况下生成脒盐酸盐，然后与丝氨醇反应，制得上述式(I)所示的抗生素。 

4.一种化学合成如权利要求1所述的二氢噁唑类抗生素的方法，其特征在于：所述方法的化学反应式如下： 

先将邻羟基苯甲氰与甲醇在乙酰氯仔在的情况下生成脒盐酸盐，燃后与D-丝氨酸甲酯反应，生成二氢噁唑，最后用硼氢化钠还原酯基，得到上述式(I)所示的抗生素。 

5.根据权利要求1所述的二氢噁唑类抗生素用于抑制人畜病原细菌的用途，所述人畜病原细菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、粪肠球菌(E.faecalis)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、猪链球菌(Swine streptococcal)、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、乳酸乳杆菌(Bacteriumlactis)、牛分枝杆菌(Mycobacterium boyis)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、大肠埃氏菌(Escherichia coil)、 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)。