[发明专利]一种甲基杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种甲基杆菌(Methylobacterium sp.)YCA-02及其在乙草胺降解中的应用。

背景技术

乙草胺是美国孟山都公司1971年开发的一种新型酰胺类除草剂，作为该类除草剂早期开发的品种，乙草胺占酰胺类除草剂当前销售量的最大份额，是目前世界上最重要的除草剂品种之一，也是目前我国使用量仅次于草甘磷的第二大类除草剂。可广泛用于玉米、水稻、甘蔗、花生、棉花、大豆、烟草、蔬菜等农作物芽前土壤处理和防除田间牛筋草、稗草、冤丝子、马唐、狗尾草、秋棱、马齿觅、臂形草、黎、鸭拓草、觅、紫香附子禾本科杂草和部分小粒种子的阔叶杂草。

进入环境的乙草胺及其代谢产物通过食物链在生物体内不断富集，可能会给哺乳动物、食草鸟类及水生生物带来不育、癌症和遗传病等严重的健康问题和环境问题。目前，国内外有关乙草胺在环境中降解动态方面的研究不多，而生物修复技术因微生物本身能对各类不同的有机污染物进行降解和转化而具有巨大的潜力。因此，从自然环境中筛选得到能够去除乙草胺的有效菌种具有重大的意义。

发明内容

发明目的：为了克服现有技术的不足，本发明的第一目的在于提供一种对乙草胺具有降解作用的甲基杆菌。

本发明的第二目的在于提供一种甲基杆菌在乙草胺降解中的应用。

技术方案：为了解决上述第一目的，本发明所采用的技术方案为：一种甲基杆菌，其分类命名为甲基杆菌(Methylobacterium sp.)YCA-02，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC），保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码为100101，保藏编号为：CGMCC No.8389，保藏日期为2013年10月24日。

为了解决上述的第二目的，本发明所采用的技术方案为：所述甲基杆菌在乙草胺降解中的应用。

具体应用为：

（1）将降解乙草胺残留的甲基杆菌YCA-02的试管种接种于LB培养基中，振荡培养至对数期；

（2）将步骤（1）培养好的菌种按10％的接种量接种入500L的种子罐，无菌空气的通气量为1:0.6-1:1.2，搅拌速度为180-240r/min，培养温度为30-35℃，培养时间为60h，培养至对数生长期，得到种子液；

（3）将步骤（2）所得到种子液按10％的接种量接入生产罐进行发酵培养，生产罐所用培养基与种子罐培养基相同，无菌空气的通气量为1:0.6-1:1.2，搅拌速度为180-240r/min，培养温度为30-35℃，培养时间为60h，发酵完成后的培养液即为应用于乙草胺降解中的甲基杆菌。

更进一步的，所述步骤（1）中LB培养基的配方为：1000mL蒸馏水，酵母粉5.0g，蛋白胨10.0g，氯化钠10.0g，pH7.0。

更进一步的，所述步骤（2）中种子罐所用培养基的配方为：葡萄糖0.8%，（NH₄）₂SO₄1%，K₂HPO₄0.2%，MgSO₄0.05%，NaCl0.01%，CaCO₃0.3%，酵母膏0.02%，pH值7.2-7.5。

本发明中所述的甲基杆菌(Methylobacterium sp.)YCA-02的生理活性特征如下：

所述甲基杆菌(Methylobacterium sp.)YCA-02主要生物学特性为G-，无芽孢，无鞭毛，卵圆形，LB培养基上菌落成圆形，突起，边缘整齐，干燥，不透明，接触酶阳性，不能水解淀粉。

有益效果：与现有技术相比，本发明的优点是：

（1）本发明公开的一种甲基杆菌(Methylobacterium sp.)YCA-02具有较广的降解谱，能使土壤中乙草胺的残留量降低90％以上，可在农作物的生长过程中正常使用化学农药进行病虫害防治的同时保证农产品中农药残留含量符合绿色食品要求；适合在全国粮油蔬菜生产出口基地或有绿色食品商标标志的地方大面积推广使用。本发明对于保护生态环境，保护人类的身体健康，提高农产品的附加值具有重要的意义。本发明成功地解决了农业生产中农药残留超标和除草剂药害问题，既充分发挥了化学农药在植物病虫草害防治中的高效快速的作用，又可以生产出无毒无公害的绿色农产品。