[发明专利]稳定的酶溶液和制造方法

说明书

本发明申请是基于申请日为2008年3月27日，申请号为“200880010193.1”(国际申请号为PCT/EP2008/053660)，发明名称为“稳定的酶溶液和制造方法”的专利申请的分案申请。

技术领域

本文公开内容涉及包含或包括酶、抑制剂和抑制剂加强剂(inhibitor booster)的液体组合物。

背景技术

在含酶液体如含酶液体洗涤剂中的储存稳定性问题是公知的。这点在含蛋白酶的液体洗涤剂中尤是如此。

现有技术已经广泛地致力于改进储存稳定性，例如通过加入蛋白酶抑制剂来进行。

已知硼酸和代硼酸(boronic acid)可逆地抑制蛋白水解酶。关于代硼酸对一种丝氨酸蛋白酶枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)的抑制的讨论在Molecular&Cellular Biochemistry51,1983,第5-32页中提供。

代硼酸具有非常不同的作为枯草杆菌蛋白酶抑制剂的能力。仅含烷基如甲基、丁基或2-环己基乙基的代硼酸是弱抑制剂，其中甲基硼酸是最弱的抑制剂，而带有芳香基如苯基、4-甲氧苯基或3,5-二氯苯基的代硼酸是良好的抑制剂，其中3,5-二氯苯基硼酸是尤其有效的一种(参见Keller等,Biochem.Biophys.Res.Com.176,1991,第401-405页)。

还已知在相对于硼的3-位具有取代的芳基硼酸是可逆性蛋白酶抑制剂。在WO92/19707中，乙酰氨基苯基硼酸(acetamidophenyl boronic acid)作为蛋白水解酶抑制剂得到描述。

另外EP0 832 174描述了接近苯基硼酸(adjacent to the phenyl boronic acid)在对位用>C=O取代的苯基硼酸衍生物在液体中具有良好的作为酶稳定剂的能力。

在配制、制造和包装包括敏感酶的液体酶组合物中仍有改进的空间，以提供在运输和储存期间不丧失(loose)酶活性的洗涤剂组合物。

发明内容

本发明的目的是提供具有改进的酶稳定性的液体酶组合物。本发明另一个目的是提供用于制造所述液体酶组合物的方法。

已经发现向包括酶和抑制剂如苯基硼酸或苯基硼酸衍生物的液体酶组合物加入抑制剂加强剂如可溶性盐使抑制剂效果显著改进，并由此相对于酶活性改进酶的储存稳定性。

本发明提供一种包括酶组分、苯基硼酸组分或其衍生物和水溶性盐组分的液体酶组合物。

本发明还涉及所述液体酶组合物的制造及其用途。

本发明的目的已经通过提供一种包括酶组分、苯基硼酸组分或其衍生物和溶解的盐组分的液体组合物而获得。在多个实施方案中，酶组分是蛋白酶如丝氨酸蛋白酶。盐组分可以包括阳离子如Cu、Ca、Mg、Zn、Na、K、NH₄和它们的组合。在多个实施方案中，盐组分可以包括选自下组的阳离子：Mg、Zn、NH₄和它们的组合。在一些实施方案中，盐组分包括阴离子，其包含氯离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、碳酸根、甲酸根和它们的组合。另外，盐组分可以包括阴离子如氯离子、硫酸根、硝酸根和它们的组合。

在特定的实施方案中，阳离子选自由Cu、Ca、Mg、Zn、Na、K、NH₄组成的组且阴离子选自由氯离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、碳酸根和甲酸根组成的组。

在一些实施方案中，液体组合物的pH为7-10.5，而在一些实施方案中，液体组合物的pH为8-9.5。

在一些实施方案中，盐组分以占总组合物重量的0.1%-20%的量存在。

本文公开内容的目的还通过提供洗涤剂组合物，如洗衣用洗涤剂组合物或洗碟用组合物而实现。

本发明的目的还可以通过提供一种用于制造液体组合物的方法来实现，所述方法包括如下步骤：提供液体；向a)的液体加入水溶性盐；与b)同时或在b)之后，在a)中加入酶和苯基硼酸或其衍生物；和混合所述液体组合物。在多个实施方案中，所述方法也可以包括将pH调节至7-9.5，或8-9的步骤。

本发明的目的还通过使用根据本文公开内容的组合物清洁物体来实现。

还通过使用盐组分来加强或增强液体酶组合物中苯基硼酸或其衍生物的抑制剂效果来实现本发明的目的。

具体地，本发明涉及如下各项：

1.一种液体组合物，其包含酶组分、苯基硼酸组分或其衍生物和溶解的盐组分。

2.项1的液体组合物，其中所述酶组分是蛋白酶。