[发明专利]一种快速定量检测半乳糖凝集素-3的胶体金试纸

说明书

技术领域

本发明属于临床医学诊断领域，具体涉及一种用于定量检测半乳糖凝集素-3(Gal-3)的胶体金试纸。

背景技术

半乳糖凝集素-3（Galectin-3，Gal-3）也称半乳糖结合蛋白-3，分子量为31kD，是半乳糖凝集素家族的重要成员之一。Galectin家族的成员需要满足两个标准：第一对-半乳糖的亲和力；第二在糖识别域(the carbohydrate recognition domain，CRD)有显著序列相似性。Galectin-3有两个功能域：羧基端是糖识别域，包含了135个氨基酸残基；氨基端包含100～150个氨基酸残基，由富含脯氨酸和甘氨酸的9个氨基酸残基串联重复组成。Galectin-3主要在巨噬细胞、嗜酸性细胞、中性粒细胞及肥大细胞中表达。其功能依据其在细胞内的定位。在静止细胞内主要存在于胞浆，而在增殖细胞中则主要存在于细胞核。Galectin-3参与调节细胞生长，抗凋亡，介导细胞黏附，参与血管形成及炎症反应等生物学功能。研究表明半乳糖凝集素-3是心肌纤维化标志物，与心力衰竭的发生和死亡风险增加相关。心室功能障碍患者的半乳糖凝集素-3含量会升高，而且含量于心衰的严重程度直接相关。快速定量检测患者的半乳糖凝集素-3水平具有重大的临床意义。

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

目前，检测半乳糖凝集素-3(Gal-3)的方法目前主要是酶联免疫技术（ELISA），ELISA技术存在以下缺点：检测设备要求高，成本高；干扰因素较多，重复性不好；检测时间长。因此酶联免疫技术检测半乳糖凝集素-3不适合临床快速诊断。鉴于目前尚无快速的定量检测方法，本发明的目的是提供一种可用于快速定量检测半乳糖凝集素-3的胶体金试纸以及一种可用于快速定量检测半乳糖凝集素-3的胶体金试纸盒，所述胶体金试纸和胶体金试纸盒具有方便快捷、操作简单、结果准确等优点。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种快速定量检测半乳糖凝集素-3的胶体金试纸，本发明所述的半乳糖凝集素-3的胶体金试纸具有方便快捷、操作简单、结果准确等优点，适于临床快速诊断。

本发明的技术方案是：

一种快速定量检测半乳糖凝集素-3的胶体金试纸，包括支撑垫片5，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜1，所述硝酸纤维素膜的一端连接吸水垫4，另一端连接偶合物垫片2，所述偶合物垫片连接样本垫片3，所述样本垫片另一端部的下方设有第一固定部件7，上方设有第二固定部件6，其特征在于，所述硝酸纤维素膜1中间部位检测线8包被有Gal-3抗体，检测线两边分别设有控制线9，所述偶合物垫片2上涂布有金标记的Gal-3单克隆抗体或多克隆抗体以及控制线偶合物。

优选地，所述控制线9包被有抗DNP抗体，所述控制线偶合物为DNP-BSA标记的胶体金。BSA是牛血清白蛋白。

优选地，所述第一固定部件7为双面胶，第二固定部件6为单面胶。

优选地，所述两条控制线9与检测线8为平行设置。

本发明的另一个目的是提供了一种快速定量检测半乳糖凝集素-3的胶体金试纸盒，在本发明所述的定量检测半乳糖凝集素-3的胶体金试纸的基础上还包括一外壳10。

所述外壳优选塑料外壳。

所述外壳包裹所述试纸，露出样本垫片3、硝酸纤维素膜1上的检测线8和两条控制线9、以及吸水垫4。

本发明所述的试纸盒具有方便携带和贮存的优点。

本发明的又一个目的是提供本发明所述的胶体金试纸在检测半乳糖凝集素-3中的应用。

本发明的再一个目的是提供一种快速定量检测半乳糖凝集素-3的方法，包括使用权利要求1所述胶体金试纸来快速定量检测半乳糖凝集素-3的步骤。