[发明专利]含卵黄膜外层蛋白1在制备治疗干眼药物中的应用

说明书

技术领域：

本发明属于药物制剂领域，具体涉及含卵黄膜外层蛋白1在制备治疗干眼药物中的应用。

背景技术：

正常的眼表面覆盖一层泪膜，稳定的泪膜是维持眼表面健康的基础。干眼是由于泪液量或质异常引起泪膜不稳定和眼表损害，从而导致的一类疾病；为最常见的眼表疾病之一，能严重影响人们的生活质量。其发病率在全球达5-30%（50岁以上），我国报道的则更高（北京：40岁以上为21%；上海：20岁以上为30%；内蒙古：40岁以上有症状50%，泪膜破裂时间缩短37%）。干眼现有的治疗手段包括非药物治疗、药物治疗和手术治疗等，而病因治疗是最佳方案。由于引起干眼的原因十分复杂，对于难以发现病因的患者，缓解干眼症状是其治疗的重要目标。不同原因引起的干眼及不同类型的干眼，其治疗方法不同，目前最方便、有效地缓解干眼症状的治疗方法是外用滴眼制剂。而人工泪液替代治疗是治疗任何类型干眼的基础治疗措施。选用人工泪液制剂时应考虑以下因素：首先，其化学成分和物理、化学特性应该与生理泪液一致。例如pH值为中性，渗透压和生理泪液相同，否则使用后可能会对眼睛产生刺激、疼痛及其他不适。其次，应含有模拟生理泪液中粘蛋白层作用的成分，使水液层更长时间依附于眼球表面，达到长时间缓解眼部干涩的作用。再次，其粘度应和生理泪液相近，使用后不会感觉粘腻或使视力模糊，而且不会影响隐性眼镜的配戴。最后，人工泪液最好不含有抗生素，并且所含的保存剂对角结膜影响极小或没有影响。长期或频繁使用人工泪液制剂者（例如每日用药超过4-6次）应首选不含防腐剂，至少所含的防腐剂不影响角膜的人工泪液，以防止其毒副作用。

VMO1最早发现于鸡蛋的卵黄膜外层，是一种水溶性蛋白质。本发明使用的是人重组vmo1，vmo1的氨基酸序列的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的51～659位所示，SEQ ID NO.1所示的序列的Genbank：BC104195.1。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供含卵黄膜外层蛋白1（VMO1）在制备治疗干眼药物中的应用。

我们发现VMO1高丰度表达于骆驼的泪液中，绵羊和小鼠的泪液中也存在此种蛋白，而人和兔的泪液中并不存在此种蛋白。泪液中的蛋白质在稳定泪膜、防御微生物感染、促进角结膜上皮愈合等方面发挥重要作用。针对相关眼病（干眼）中泪液蛋白表达谱的变化情况，有人尝试将溶菌酶、乳铁蛋白引入人工泪液的研制中，用于补充浓度降低的蛋白质，以维持泪膜的稳定及防御眼表微生物的感染。

本发明通过实验发现，卵黄膜外层蛋白1（其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的51～659位所示）可以延长小鼠和大鼠的泪膜破裂的时间，因此可以用于治疗干眼。

本发明的第二个目的是提供一种治疗干眼的外用滴眼制剂，其特征在于，含有有效量的含卵黄膜外层蛋白1和辅料。

所述的含卵黄膜外层蛋白1的氨基酸序列，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的51～659位所示。

所述的含卵黄膜外层蛋白1，其含量为每100ml滴眼制剂中含卵黄膜外层蛋白10.3～0.75g。含卵黄膜外层蛋白1溶解在滴眼制剂中，其可以是纯蛋白、复合蛋白或其混合物。

外用滴眼制剂根据眼部对渗透压及PH值的耐受有一定范围的要求，加入一定量的辅料如渗透压调节剂、PH值调节剂以减少滴眼制剂的刺激性，提高顺应性，保证治疗的顺利实施。根据滴眼制剂为多次给药制剂，可以添加一种或多种一定量的防腐剂。

所述的辅料包括透明质酸或其盐、渗透压调节剂和PH值调节剂。

所述的透明质酸或其盐占滴眼制剂总质量的0.1-0.5%，优选为透明质酸钠。透明质酸或其盐用来增加滴眼制剂的粘度，其粘度可以通过调整浓度来调节，其中透明质酸钠效果最佳。

滴眼制剂的渗透压最佳为等渗，但眼部可耐受一定范围的低渗或高渗溶液。因正常情况下泪液的渗透压为295-309mOsm/l，所以本发明的外用滴眼制剂将渗透压控制在295-309mOsm/l之间，保持与泪液的一致性，尽量减少对眼睛的刺激。

所述渗透压调节剂可选自氯化钠、氯化钾、葡萄糖、甘露醇、聚乙二醇或其混合物。

本发明采用加入PH值调节剂调节PH值，滴眼制剂的PH值维持在眼睛可耐受的范围内，一般为5-9。因正常情况下泪液的PH值一般在5.20-8.35之间，所以本发明的外用滴眼制剂将PH值控制在5.20-8.35之间，保持与泪液的一致性，尽量减少对眼睛的刺激。