[发明专利]从南极磷虾虾青素二酯中分离出饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从南极磷虾虾青素二酯中分离出饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的方法。

背景技术

南极磷虾是南大洋生物链的关键物种，是世界上生物质能最大的、进化最成功的单种生物资源，约6～50亿吨（因估计方法不同有较大差异，最低保守估计也有6～10亿吨），年可捕获量达1～1.5亿吨，多于全世界年渔业捕获总量（0.99亿吨），我国有18亿亩耕地，粮食年产量近6亿吨，南极磷虾的年可捕获量相当于3～4.5亿亩耕地，是庞大的境外资源。

南极磷虾含丰富的油脂成分，尤其含丰富的虾青素、虾青素一酯和虾青素二酯。虾青素二酯是虾青素的两端各连接一个脂肪酸分子。该脂肪酸分子可能是饱和的，也可能是不饱和的（包括单不饱和的和多不饱和的脂肪酸），因此虾青素二酯是一个分子群，其中的每个分子在南极磷虾的生长发育中均起着重要的作用。将富含饱和脂肪酸的虾青素二酯和富含不饱和脂肪酸的虾青素二酯分离开来，有利于推进对虾青素二酯的再分离、纯化和生理活性差异的研究，也有益于未来生产制备不同饱和程度的虾青素二酯的有效利用。目前尚无一种有效的从南极磷虾虾青素二酯中分离出饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的方法。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一种从南极磷虾虾青素二酯中分离出饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的方法，即：对南极磷虾虾青素二酯进行分离的方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

从南极磷虾虾青素二酯中分离出饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的方法，如下：

取南极磷虾虾青素二酯30mg（是采用公开号为CN102731358A的专利申请中的方法制备得到的），溶解在1.5ml丙酮中，得虾青素二酯溶液，取0.5ml，用毛细点样管在AgNO₃高效薄层板上将其点成线（距板下沿1.5cm处），然后放在加有24ml展开剂的玻璃层析缸[200mm×200mm（L×H）]内展开；展开后，取出晾干，可见虾青素二酯被展开呈5条带，从上（指溶剂前沿）至下依次为：①第一条红色带Rf为0.88；②第二条黄色带Rf为0.75；③第三条红色带Rf为0.69；④第四条黄色带Rf为0.63；⑤第五条黄色带Rf为0.40；将5条带分别刮下，各自放入盛有丙酮的试管中，5个试管在40KHz、200～500W功率下超声3～10分钟，然后在4000～6000r/min下离心，取上清液，重复以上提取过程3～5次至刮下的条带无色，分别得到5条带各自对应的提取液，旋转蒸发除去丙酮，分别得到5种样品，经检测分析，这5种样品依次为（下述序号对应上述条带）（各百分数按质量百分比计）：

①含饱和脂肪酸62～63％、不饱和脂肪酸37～38％的虾青素二酯（对应第一条红色带），其中单不饱和脂肪酸占不饱和脂肪酸的100%；

②含饱和脂肪酸73～75％、不饱和脂肪酸25～27％的虾青素二酯（对应第二条黄色带）,其中单不饱和脂肪酸占不饱和脂肪酸的98.0%；

③含不饱和脂肪酸82～84％、饱和脂肪酸16～18％的虾青素二酯（对应第三条红色带），其中单不饱和脂肪酸占不饱和脂肪酸的85.4%；

⑤含不饱和脂肪酸75～77％、饱和脂肪酸23～25％的虾青素二酯（对应第五条黄色带），其中单不饱和脂肪酸占不饱和脂肪酸的5.4%；

④含不饱和脂肪酸53～55％、饱和脂肪酸45～47％的虾青素二酯（不饱和脂肪酸稍多于饱和脂肪酸）（对应第四条黄色带），其中单不饱和脂肪酸占不饱和脂肪酸的1.9%。

利用上述AgNO₃高效薄层板分离法除了得到富含饱和脂肪酸的虾青素二酯和富含不饱和脂肪酸的虾青素二酯外，该方法还显示，从第一条带（12碳～18碳）至第五条带（14碳～22碳)，碳链越来越长，且从第一条带（不饱和脂肪酸只有单不饱和脂肪酸）至第五条带（不饱和脂肪酸含有多不饱和脂肪酸),不饱和键从上至下逐渐增多，单不饱和脂肪酸占不饱和脂肪酸百分量从第一至第五条带逐渐减少。

所述AgNO₃高效薄层板是通过以下方法制备得到的：将薄层层析硅胶板H（10cm×20cm）在质量浓度为0.5～2％的AgNO₃甲醇溶液中浸泡5～15分钟，取出，晾干0.5～2小时，再放入干燥箱中40～80℃烘0.5～2小时，即得。

所述展开剂是由体积比为3：1的正己烷和丙酮组成的。