[发明专利]一种测定长春西汀含量的HPLC方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种测定长春西汀含量的HPLC方法。 

背景技术

 长春西汀（Vinpocetine）即阿扑长春胺酸乙酯（结构式见附图1），是从夹竹桃科小蔓长春花中萃取得到的一种天然药物，属于吲哚类生物碱。长期以来，临床上用于脑梗塞后遗症、脑出血后遗症、脑动脉硬化等的治疗和预防，近年来研究进一步发现，长春西汀不仅对预防和治疗缺血性脑血管疾病、脑动脉硬化症、高血压、冠心病的高粘血症以及卒中后遗症有很好的疗效，而且还对改善老年性记忆障碍和健康人群的精神活动等有一定的生理活性价值。另外，对思维混乱、注意力不集中、易怒、视觉和听觉异常、情绪波动等有一定的效果。随着我国人口老龄化的增加，心脑血管疾病也日益剧增，由于长春西汀对心脑血管疾病具有良好的临床疗效，应用范围也日益广泛。该药30年前首先由匈牙利GedeonRichter公司开发成功，目前世界两大长春西汀生产商为西班牙Covex和瑞士Linnea，其市场占有量为世界用量的90%以上，每年销售额在10亿美元左右。中国国内注册生产长春西汀口服制剂和注射剂的厂家有60多家，其中95%以上的长春西汀原料来源于国外，中国国内只东北制药和江苏勤奋药业有生产文号。

长春西汀虽然是老药，但是目前研究的团队比较多，有关长春西汀研究报道的文献近十年也有近900篇，多为国外报道。但是有关长春西汀含量测定的HPLC检测方法却鲜有报道，药典EP7.5和BP2010及USP36-31中有关长春西汀含量测定方法均采用滴定法，滴定分析的专属性差，如原料纯度不够，结果会出现较大的差异。为解决以上缺陷，将发明创造采用HPLC法测定长春西汀含量，采用甲醇-乙腈-乙酸铵混合溶液作为系统检测的流动相，检测灵敏度高，分离效果好，分析方法简便，重现性好，同时能最大限度检测到长春西汀的相关物质，为该产品的稳定性提供了检测依据。

发明内容

    本发明的目的是提供一种长春西汀含量测定的HPLC方法，所述测定方法采用HPLC法在双波长下对长春西汀及其有关物质进行同时测定，方法操作简便快捷、分离效果好、灵敏度高，重现性好。为达上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种长春西汀含量测定的HPLC方法，其特征在于包括下述步骤：

1）分别制备长春西汀对照品（中国药检所，批号100947-201102）溶液和供试品溶液，长春氨酸乙酯和阿朴长春胺对照品溶液；

    2）利用HPLC法在双波长下同时检测长春西汀的含量；

色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充物，本发明选用流动相中甲醇的体积百分比由10%递增至35%；乙腈的体积百分比由30%递增至50%；乙酸铵溶液（0.1M）的体积百分比由60%递减至15%；柱温25℃~40℃；体积流量0.8~1.5ml/min；检测波长为250nm和280nm；进样量1μl~15μl；理论塔板数按长春西汀峰计算不得低于5000；

3）根据高效液相色谱分析结果计算长春西汀的含量。  

进一步地，本发明HPLC方法的色谱条件为：色谱柱为Thermo-C18 （ 250mm×4.6mm ，5μm），流动相为甲醇：乙腈：乙酸铵溶液（0.1M）=20：45：35（体积比）；柱温35℃；体积流量1.0ml/min；检测波长为250nm和280nm；进样量10μl。

进一步地，本发明HPLC分析方法中，长春西汀对照品溶液和供试品溶液、长春氨酸乙酯和阿朴长春胺对照品溶液制备方法包括：分别取长春西汀对照品和供试品、长春氨酸乙酯对照品和阿朴长春胺对照品适量，精密称定，加0.01mol/L盐酸溶液适量，分别用乙腈稀释配置成浓度为50、50、100和100μg/ml的长春西汀对照品溶液和供试品及杂质对照品溶液。 

附图说明

图1为长春西汀的结构式。

图2为本发明长春西汀含量测定的HPLC检测图谱。

具体实施方式

在下面的实施例中进一步说明本发明的详细分析方法，但本发明并不局限于下述详细分析方法。

 

实施例1  长春西汀对照品溶液和供试品溶液的制备

分别取长春西汀对照品和供试品适量，精密称定，加0.01mol/L盐酸溶液适量，分别用乙腈稀释制成浓度为50μg/ml的长春西汀对照品溶液和供试品溶液，摇匀，微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。

实施例2 筛选长春西汀含量测定的条件。

长春西汀对照品溶液和供试品溶液的制备：按照实施例1所述的方法制备