[发明专利]支链α-葡聚糖及生成其的α-葡糖基转移酶和它们的制造方法以及用途有效
| 申请号: | 201410065367.1 | 申请日: | 2008-04-23 |
| 公开(公告)号: | CN103865967B | 公开(公告)日: | 2018-08-31 |
| 发明(设计)人: | 渡边光;山本拓生;西本友之;津崎桂二;奥和之;茶圆博人;福田惠温 | 申请(专利权)人: | 株式会社林原 |
| 主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P19/04;C08B37/02;C12N9/10;A61K31/716;A61K8/73;A61P3/10;A61P3/04 |
| 代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 李英 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 聚糖 生成 葡糖 转移酶 它们 制造 方法 以及 用途 | ||
1.一种以葡萄糖为构成糖的支链α-葡聚糖的混合物,其是作为水溶性食物纤维有用的混合物,其特征在于
其具有下列(A)~(E)的特征:
(A)作为整体在甲基化分析中具有下述(1)~(4)的特征:
(1)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇之比在1:0.6~1:4的范围;
(2)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇的总计占部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的60%以上;
(3)2,4,6-三甲基-1,3,5-三乙酰基葡萄糖醇为部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5%以上且小于10%;及
(4)2,4-二甲基-1,3,5,6-四乙酰基葡萄糖醇为部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5%以上;
(B)当其被异麦芽糖糊精酶消化时,每单位消化物的固体成分生成异麦芽糖25质量%以上50质量%以下;
(C)利用作为高效液相色谱法的酶-HPLC法求出的水溶性食物纤维含量为40质量%以上;
(D)基于凝胶过滤高效液相色谱法的分子量分布分析得到的重均分子量是2,979道尔顿以上、65,700道尔顿以下;
(E)重均分子量除以数均分子量所得的值小于20;且
其通过将α-葡糖基转移酶作用于麦芽糖和/或葡萄糖聚合度3以上的α-1,4葡聚糖而得到,所述α-葡糖基转移酶源于具有下述酶活性(F)的属于芽孢杆菌属(Bacillus)或节杆菌属(Arthrobacter)的微生物:
(F)当所述α-葡糖基转移酶在40℃、pH6.0作用于1w/v%的麦芽五糖水溶液24小时时,生成支链α-葡聚糖的混合物,所述支链α-葡聚糖的混合物作为整体在甲基化分析中具有下述(5)~(8)的特征:
(5)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇之比在1:0.6~1:4的范围;
(6)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇的总计占部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的60%以上;
(7)2,4,6-三甲基-1,3,5-三乙酰基葡萄糖醇为部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5%以上且小于10%;及
(8)2,4-二甲基-1,3,5,6-四乙酰基葡萄糖醇为部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5%以上。
2.一种属于芽孢杆菌属(Bacillus)或节杆菌属(Arthrobacter)的微生物来源的α-葡糖基转移酶,其特征在于,
当所述α-葡糖基转移酶在40℃、pH6.0作用于1w/v%的麦芽五糖水溶液24小时时,具有生成支链α-葡聚糖混合物的活性,所述支链α-葡聚糖的混合物作为整体在甲基化分析中具有下述(1)~(4)的特征:
(1)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇之比在1:0.6~1:4的范围;
(2)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇的总计占部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的60%以上;
(3)2,4,6-三甲基-1,3,5-三乙酰基葡萄糖醇为部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5%以上且小于10%;及
(4)2,4-二甲基-1,3,5,6-四乙酰基葡萄糖醇为部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5%以上,且
所述α-葡糖基转移酶具有下述(a)~(e)的理化性质:
(a)分子量:在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中,为90,000±10,000道尔顿;
(b)最适温度:在pH6.0反应30分钟的条件下,为50~55℃;
(c)最适pH:在40℃反应30分钟的条件下,为5.0~6.3;
(d)温度稳定性:在pH6.0保持60分钟的条件下,40℃以下是稳定的;及
(e)pH稳定性:在4℃保持24小时的条件下,至少在pH4.0~8.0内稳定。
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