[发明专利]一种采收与加工对金银花品质影响的实验方法

权利要求书

1.一种采收与加工对金银花品质影响的实验方法，其特征在于，该采收与加工对金银花品质影响的实验方法包括：

用高效液相色谱法测定金银花中氯原酸的含量，以超声提取法提取金银花中绿原酸；

以大白期金银花为材料对杀青干燥、蒸后烘干、直接晒干、硫熏干燥对金银花外观性状和有效成分绿原酸的影响进行比较分析，确定金银花的加工方法以杀青干燥为主，选择杀青烘干法条件为杀青温度120℃，时间90秒；

采摘五月下旬至六月下旬，以及九月中旬至十月中旬的金银花，比较不同采收时间对金银花中绿原酸含量的影响，确定金银花中绿原酸的含量以五月底六月初时含量最高；

通过比较不同产地不同品种金银花中绿原酸的含量，是否高于1.5%，确定产地的物候条件是否适宜种植金银花；

分别对金银花王，湘蕾一号，湘蕾二号，大花金银花不同品种金银花进行绿原酸含量测定，以确定大面积适宜种植的产品。

2.如权利要求1所述的采收与加工对金银花品质影响的实验方法，其特征在于，通过比较不同提取方法对绿原酸含量影响的方法为：

步骤一，色谱条件及系统适用性实验：

色谱柱：ZOBAXSB－C18柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：乙腈-0.4％磷酸溶液14：86；流速：1.0ml·min^-1；柱温：35℃；检测波长：327nm；进样体积：5μL，理论塔板数按绿原酸峰计算大于3000，与相邻色谱峰的达到基线分离，重复性好；

步骤二，供试品溶液的制备：

取金银花样品研成细粉，过四号筛，称取细粉0.5g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀即得；

取金银花样品研成细粉，过四号筛，称取细粉0.5g，置圆底烧瓶中，加入70%乙醇50ml，回流提取30min，过滤，药渣重复上述操作，合并两次滤液，浓缩，定容至50ml容量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀即得；

取金银花样品研成细粉，过四号筛，称取细粉0.5g，置圆底烧瓶中，加入水50ml，煮沸30min，过滤，药渣重复上述操作，合并两次滤液，浓缩，定容至50ml容量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀即得；

步骤三，对照品溶液的制备：

称取绿原酸对照品，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每ml含0.1096mg的溶液，即得对照品溶液；

步骤四，线性关系考察：

吸取对照品溶液1.0ml，2.0ml，3.0ml，4.0ml，5.0ml，分别置棕色量瓶中加50%甲醇稀释至10.0ml，摇匀，按色谱条件测定绿原酸的峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程Y=2.19×10⁸X-1.52×10⁵，r=0.9996，绿原酸进样浓度在21.20μg·ml^-1～106.0μg·ml^-1内峰面积积分值与浓度呈线性关系；

步骤五，进样精密度实验：

吸取对照品溶液2.0ml，置棕色量瓶中加50%甲醇稀释至10.0ml，摇匀，作为对照液，连续进样5次，进行测定，峰面积的RSD=0.71%；

步骤六，稳定性实验：

吸取步骤四下对照液，分别在0h，2h，4h，8h，12h进样，进行测定，绿原酸峰面积的RSD=0.77%，结果表明在12h内稳定性较好；

步骤七，重复性实验：

称取同一号样品五份，按步骤二供试品项下操作，制得供试品溶液，进行测定，绿原酸平均质量分数的RSD＝2.12％；

步骤八，加样回收实验：

称取已知含量的样品五份，加入对照品溶液2.0ml或0.212mg·ml^-1，按步骤二的方法制备供试品溶液，测定并计算回收率，得平均加样回收率为102.3％，RSD＝1.57％；

步骤九，样品测定：

按步骤二的供试品溶液制备方法制备3个样品溶液，以0.45μm微孔滤膜过滤，分别进样测定，用外标法计算样品中绿原酸的百分含量。